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更新時間:2017-06-05 15:26:40瀏覽次數(shù):89次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網人腦星形膠質母細胞瘤;U-87 MG U87MG;U87 MG
公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、 Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-570技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-570
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:3傳代;2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,10;D12S391:19,20;D13S317:11,11;D16S539:12,12;D18S51:12,16;D19S433:13,13;D21S11:30,30;D2S1338:17,20;D3S1358:17,17;D5S818:12,12;D6S1043:13,13;D7S820:8,12;D8S1179:13,14;;FGA:25,25;Penta E:16,16;TH01:9,9;TPOX:8,8;vWA:16,17;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-570處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。V-Myb髓細胞組織增生病毒癌基因同源物(MYB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素25(IL25)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for V-Myb Myeloblastosis Viral Oncogene Homolog (MYB)48T/96T
70kDa熱休克蛋白4(HSPA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素25(IL25)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 4 (HSPA4)48T/96T
泛素連接酶E3A(UBE3A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)生長分化因子2(GDF2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Ubiquitin Protein Ligase E3A (UBE3A)48T/96T
多聚免疫球蛋白受體(PIGR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)生長分化因子2(GDF2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Polymeric Immunoglobulin Receptor (PIGR)48T/96T
促胰液素(SCT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)生長分化因子2(GDF2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Secretin (SCT)48T/96T
促胰液素受體(SCTR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素17B(IL17B)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Secretin Receptor (SCTR)48T/96T
ⅡD組磷脂酶A2(PLA2G2D)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素17B(IL17B)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IID (PLA2G2D)48T/96T
S100鈣結合蛋白A13(S100A13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素17B(IL17B)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A13 (S100A13)48T/96T
通用轉錄因子ⅡH肽1(GTF2H1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素26(IL26)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for General Transcription Factor IIH, Polypeptide 1 (GTF2H1)48T/96T
S100鈣結合蛋白A12(S100A12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素32(IL32)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A12 (S100A12)48T/96T
70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素γ誘導單核因子(MIγ)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1A (HSPA1A)48T/96T
70kDa熱休克蛋白9(HSPA9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素γ誘導單核因子(MIγ)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 9 (HSPA9)48T/96T
Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-570甘丙肽(GAL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素γ誘導單核因子(MIγ)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Galanin (GAL)48T/96T
線粒體超氧化物歧化酶(SOD2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)表皮調節(jié)素(EREG)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial (SOD2)48T/96T
腸堿性磷酸酶(ALPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)表皮調節(jié)素(EREG)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Iestinal (ALPI)48T/96T
早期生長應答因子4(EGR4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)轉化生長因子β3(TGFβ3)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Early Growth Response Protein 4 (EGR4)48T/96T
35kDa核孔蛋白(NUP35)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)轉化生長因子β3(TGFβ3)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Nucleoporin 35kDa (NUP35)48T/96T
37kDa核孔蛋白(NUP37)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)轉化生長因子β3(TGFβ3)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Nucleoporin 37kDa (NUP37)48T/96T
*S轉移酶κ1(GSTκ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)轉化生長因子β3(TGFβ3)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glutathione S Transferase Kappa 1 (GSTk1)48T/96T
*S轉移酶π1(GSTπ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素4誘導蛋白1(IL4I1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glutathione S Transferase Pi (GSTp)48T/96T
肝腎骨堿性磷酸酶(ALPL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素4誘導蛋白1(IL4I1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Liver/Bone/Kidney (ALPL)48T/96T
骨涎蛋白(BSP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素誘導跨膜蛋白2(IFITM2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Bone Sialoprotein (BSP)48T/96T
*ⅩⅢA1肽(F13A1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素誘導跨膜蛋白2(IFITM2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide (F13A1)48T/96T
腦指蛋白(BFP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素誘導跨膜蛋白2(IFITM2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Brain Finger Protein (BFP)48T/96T
核基質蛋白4(NMP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素誘導跨膜蛋白3(IFITM3)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Nuclear Matrix Protein 4 (NMP4)48T/96T
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