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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-06-02 22:29:13瀏覽次數(shù):158次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 RAW264.7
公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)說(shuō)明書技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫(kù),以及部分國(guó)內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)說(shuō)明書
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 1957年2月18日,Madin SH和Darby NB從一只表觀正常的成年牛腎臟建立了MDBK細(xì)胞株,可用于定量檢測(cè)逆轉(zhuǎn)錄病毒的復(fù)制。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:4傳代,每周換液2次。
傳代情況 P116
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)說(shuō)明書處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過(guò)滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無(wú)菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
〖其他名稱〗:5-*鹽水合物;腺苷-5'-三磷酸二鈉鹽水合物;ATP二鈉水合物
〖號(hào)〗:34369-07-8
C10H14N5Na2O13P3?xH2O=551.14 (anhydrous basis)
〖級(jí)別〗:試劑級(jí)
〖含量〗:≥98.0%
〖重金屬〗:≤0.003%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或類色粉末,無(wú)臭無(wú)味,有引濕性。〖熔點(diǎn)〗188-190℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考) ATP依賴酶系統(tǒng)的底物
〖保存〗:-20℃
胞嘧啶
〖英文名稱〗:Cytosine;4-Amino-2(1H)-pyrimidinone;2-Oxy-4-amino pyrimidine
〖其他名稱〗:4-氨基-2-羥基嘧啶;細(xì)胞堿;細(xì)胞嘧啶;氧胞嘧啶;胞嗪;4-氨基-2(1H)嘧啶酮
〖號(hào)〗:71-30-7
C4H5N3O=111.10
〖級(jí)別〗:試劑級(jí)
〖含量〗:≥99.0%(HPLC)
〖重金屬〗:≤10ppm
〖干燥失重〗:≤0.50%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色結(jié)晶粉末。100℃失水,300℃時(shí)成棕色,320~325℃分解。1g能溶于130ml水,微溶于乙醇,不溶于乙迷。pH2時(shí),Z大吸收波長(zhǎng)276nm,Z小吸收波長(zhǎng)238nm,吸光度比值A(chǔ)250/A260=0.48、A280/A260=1.53、A290/A260=0.78,有刺激性
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
5′- 胞苷單磷酸
〖英文名稱〗:5′-CMP;Cytidine 5′-monophosphate;Cytidylic acid;5'-cytidylate monophosphate;Cytidine 3'-(dihydrogen phosphate)
〖其他名稱〗:5′- 胞苷酸;5'-單磷酸胞苷;5'-胞嘧啶核苷酸;5'-胞甙酸;5'-磷酸胞嘧啶核苷;胞苷-5’-單磷酸;胞苷-5′磷酸;胞苷-5'-一磷酸
〖號(hào)〗:63-37-6
牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)說(shuō)明書C9H14N3O8P=323.20
〖級(jí)別〗:試劑級(jí)
〖含量〗:≥98.0%
〖干燥失重〗:≤3.0%
〖重金屬〗:≤20ppm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或類色結(jié)晶粉末,溶于水,不溶于乙醇。〖熔點(diǎn)〗:233℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:2~8℃
5-胞苷一磷酸二鈉鹽
〖英文名稱〗:5′-CMP,2Na;Cytidine 5′-monophosphate
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