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非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C操作步驟

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更新時間:2017-06-02 21:42:07瀏覽次數(shù):128次

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非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C操作步驟培養(yǎng)的前一周內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)量問題, 客戶可憑細胞的照片以及書面形式的細胞培養(yǎng)實驗操作過程提供給我公司。 經(jīng)公司技術人員核實認定為可以予以重發(fā)的情況,由公司再免費提供一次細胞。

公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C操作步驟技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構建系。
細胞名稱 非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C操作步驟
形態(tài)特性  上皮樣細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  Vero-HCV-C細胞整合有丙型肝炎病毒的Core基因,能穩(wěn)定表達C蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權限 A類


非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C操作步驟處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。AS號〗:1022-79-3 
C9H12BrN3O4=306.11
〖級別〗:試劑級
純度:≥98.0%(HPLC)
水分:≤1.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或類色粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:2~8℃
5-碘-2-脫氧胞苷
〖英文名稱〗:5-IDC;5-Iodo-2-Deoxycytidine;4-Ami-[(2R,4S,5R)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-iodopyrimidin-2-one 
〖其他名稱〗:碘脫氧胞苷;伊巴他濱;5-碘-2'-脫氧胞嘧啶核苷
〖號〗:611-53-0 
C9H12IN3O4=353.11 
〖級別〗:試劑級
純度:≥99.0%
〖熔點〗:179~182℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或類色晶體或粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:-20℃
5-碘-2-脫氧尿苷
〖英文名稱〗:5-IDU;5-Iodo-2-Deoxyuridine;(+)-5-Iodo-2'-deoxyuridine;2'-Deoxy-5-iodouridine; Idoxuridine
〖其他名稱〗:5-碘代-2'-脫氧*核苷;* 
〖號〗:54-42-2 
C9H11IN2O5=354.10 
〖級別〗:試劑級
純度:≥99.0%(HPLC)
非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C操作步驟〖熔點〗:190~195℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或類色結晶粉末,極微溶于水,幾乎不溶于方、乙迷,微溶于乙醇、丙同,在酸性溶液中穩(wěn)定,溶液遇光或高壓滅菌時被分解
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:-20℃
2′-疊氮脫氧尿苷
〖英文名稱〗:2′-Azido-2′-deoxyuridine
〖其他名稱〗:2'-疊氮-2'-脫氧尿苷
〖號〗:26929-65-7
C9H11N5O5=269.21
〖級別〗:試劑級
純度:≥95.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或類色粉末。〖熔點〗:149~153℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:2~8℃
阿糖尿苷

 

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