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SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7實(shí)驗(yàn)方法

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公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7實(shí)驗(yàn)方法技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫,以及部分國內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7實(shí)驗(yàn)方法
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞株源自CV-1細(xì)胞株,經(jīng)轉(zhuǎn)染起始點(diǎn)缺失的SV40毒突變體得到;編碼表達(dá)野生型T抗原,所以該細(xì)胞適合作為需要SV40 T抗原表達(dá)的載體的轉(zhuǎn)染宿主。該細(xì)胞表達(dá)T抗原,允許SV40毒的溶解性生長,支持40℃時(shí)溫度敏感性A209毒的復(fù)制,支持起始區(qū)域缺陷的SV40突變體的復(fù)制。因含有SV40毒的DNA序列,該細(xì)胞需要在*中操作。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
傳代方法  1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR  -
同工酶 
染色體  51-129
使用權(quán)限 A類
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7實(shí)驗(yàn)方法處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時(shí)。
4、嚴(yán)格無菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
C24H34O5=402.52
〖級別〗:試劑級
〖含量〗:≥98.5%
〖比旋光度〗:+29.0~+32.5°
〖熔點(diǎn)〗:231~242℃
〖干燥失重〗:≤1.0%
〖重金屬〗:≤20ppm
〖灼燒殘?jiān)剑?le;0.30%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色疏松狀結(jié)晶粉末。15℃時(shí)溶解度(g/L):水0.18,醇3.3,醚0.46,方9.04,苯1.04,丙同7.76,乙酸乙酯7.4,冰乙酸7.42。無臭,味苦。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT
脫氫膽酸
〖英文名稱〗:Dehydrocholic acid;3,7,12-Trioxo-5beta-cholan-24-oic acid
〖其他名稱〗:脫氫膽酸;3,7,12-三氧-5β-膽烷酸
〖號〗:81-23-2
C24H34O5=402.52
〖級別〗:試劑級
〖含量〗:≥98.5%
〖比旋光度〗:+29.0~+32.5°
〖熔點(diǎn)〗:231~242℃
〖干燥失重〗:≤1.0%
〖重金屬〗:≤20ppm
〖灼燒殘?jiān)剑?le;0.30%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色疏松狀結(jié)晶粉末。15℃時(shí)溶解度(g/L):水0.18,醇3.3,醚0.46,方9.04,苯1.04,丙同7.76,乙酸乙酯7.4,冰乙酸7.42。無臭,味苦。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT
熊脫氧膽酸
〖英文名稱〗:UDCS;Ursodeoxycholic acid;3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid;3alpha,7beta-Dihydroxy-6beta-cholan-24-oic acid;Ursodiol
〖其他名稱〗:烏索去氧膽酸;熊脫氧膽酸;熊果去氧膽酸;3α,7β-二羥基-5β-膽甾烷-24-酸;烏索脫氧膽酸
〖號〗:128-13-2
C24H40O4=392.57
〖級別〗:試劑級
〖含量〗:≥98.0%
〖比旋光度〗:+59~+62°(20℃, 589nm) (c=2, 乙醇)
〖熔點(diǎn)〗:203~206℃
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7實(shí)驗(yàn)方法〖干燥失重〗:≤1.0%
〖重金屬〗:≤20ppm
〖灼燒殘?jiān)剑?le;0.20%

 

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