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非洲綠猴腎細胞;VERO實驗方法

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更新時間:2017-06-02 21:32:52瀏覽次數(shù):130次

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公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、非洲綠猴腎細胞;VERO實驗方法技術(shù)培訓、售后服務(wù),其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構(gòu)建系。
細胞名稱 非洲綠猴腎細胞;VERO實驗方法
形態(tài)特性  上皮樣,多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性  Vero細胞株是日本千葉大學的Yasumura Y和Kawakita Y從正常成年非洲綠猴的腎臟組織中分離建立的。該細胞常作為轉(zhuǎn)染宿主,用于支原體的檢測。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
傳代方法  1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR  -
同工酶 
染色體  54-61
使用權(quán)限 A類
非洲綠猴腎細胞;VERO實驗方法處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色結(jié)晶粉末或片狀結(jié)晶。味苦。易溶于乙醇、冰乙酸,微溶于方、乙迷,幾乎不溶于水。半數(shù)致死量1000mg/kg(大鼠,腹腔)、310mg/kg(大鼠,靜脈)
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT
脫氧鵝膽酸
〖英文名稱〗:CDCA;Chenodeoxycholic acid;3alpha,7alpha-Dihydroxy-5beta-cholanic acid;Chenodiol
〖其他名稱〗:脫氧鵝膽酸;鵝脫氧膽酸;3α,7α-二羥基膽質(zhì)酸;3α,7α-二羥基-5-β-膽烷酸;護肝素
〖號〗:474-25-9
C24H40O4=392.57
〖級別〗:試劑級
〖含量〗:≥98.0%(滴定法)
〖比旋光度〗:+11~+15°
〖干燥失重〗:≤2.0%
〖化物〗:合格
〖灼燒殘渣〗:≤0.20%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或淡黃色結(jié)晶粉末。味苦、有異臭。易溶于乙醇、甲醇、丙同和乙酸,幾乎不溶于水、石油醚和苯?!既埸c〗:113℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
非洲綠猴腎細胞;VERO實驗方法鵝脫氧膽酸
〖英文名稱〗:CDCA;Chenodeoxycholic acid;3alpha,7alpha-Dihydroxy-5beta-cholanic acid;Chenodiol
〖其他名稱〗:脫氧鵝膽酸;鵝脫氧膽酸;3α,7α-二羥基膽質(zhì)酸;3α,7α-二羥基-5-β-膽烷酸;護肝素
〖號〗:474-25-9
C24H40O4=392.57
〖級別〗:試劑級
〖含量〗:≥98.0%(滴定法)
〖比旋光度〗:+11~+15°
〖干燥失重〗:≤2.0%
〖化物〗:合格
〖灼燒殘渣〗:≤0.20%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或淡黃色結(jié)晶粉末。味苦、有異臭。易溶于乙醇、甲醇、丙同和乙酸,幾乎不溶于水、石油醚和苯?!既埸c〗:113℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
3α,7α-二羥基膽質(zhì)酸
〖英文名稱〗:CDCA;Chenodeoxycholic acid;3alpha,7alpha-Dihydroxy-5beta-cholanic acid;Chenodiol
〖其他名稱〗:脫氧鵝膽酸;鵝脫氧膽酸;3α,7α-二羥基膽質(zhì)酸;3α,7α-二羥基-5-β-膽烷酸;護肝素
〖號〗:474-25-9
C24H40O4=392.57
〖級別〗:試劑級

 

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