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更新時間:2017-06-02 21:17:16瀏覽次數(shù):129次
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公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、 SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1說明書技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構建系。
細胞名稱 SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1說明書
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞源自CV-1細胞株,經(jīng)轉染編碼野生型T抗原、起始點缺陷突變的SV40得到;細胞中整合有SV40基因組完整早期區(qū)段的單個拷貝。該細胞表達T抗原,適用于需要SV40T抗原表達的載體的轉染;保留SV40溶細胞性生長的特性;支持40℃時溫度敏感性A209病毒的復制;支持早期區(qū)段缺失的SV40純體的復制。因含有SV40的DNA序列,該細胞需要在*中操作。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體 99-110
使用權限 A類
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1說明書處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
用法:稱取本品61克,加熱溶解于1000ml蒸餾水中, 分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至60℃傾注平板備用
注意事項:Brewer氏改良方。細菌接種后應加蓋培養(yǎng)基5-10毫升,以蓋滿表面為準,有利于造成厭氧環(huán)境
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃色干燥粉末。易吸濕。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)用于梭菌和其他厭氧菌的分離培養(yǎng)
〖保存〗:RT
亞硫酸鈉
〖英文名稱〗:Anaerobic Broth
〖其他名稱〗:GAM肉湯;厭氧菌液體培養(yǎng)基
〖級別〗:BR
成分(g/L)
胰酪胨:17.0
大豆胨:3.0
葡萄糖:6.0
硫乙醇酸鈉:0.5
亞硫酸鈉:0.1
化鈉:2.5
刃天青:0.001
L-半*:0.25
瓊脂:0.7
PH:7.2-7.4
用法:取本品30g,加1000ml蒸餾水,加熱溶解,趁熱濾清經(jīng)121℃高壓滅菌15分鐘,待冷至45℃,無菌加入*1溶液(終濃度1mg/L)及化血紅素溶液(終濃度6mg/L)混勻后備用
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃色干燥粉末。易吸濕。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)用于專性厭氧菌培養(yǎng)
〖保存〗:RT
〖*〗
〖英文名稱〗:Lactose-Gelatin Medium
〖級別〗:BR
成分(g/L)
胰胨:5.0
蛋胨:10.0
酵母浸粉:10.0
乳糖:10.0
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1說明書〖*〗:5.0
明膠:120.0
酚紅:0.005
PH:7.3-7.7
用法:稱取本品160g,加1000ml蒸餾水,加熱溶解,分裝試管,121℃高壓滅菌15分鐘后,迅速冷卻
標準:CP2005
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:干燥粉末。易吸濕。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用
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