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人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞;EA.hy926操作步驟

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更新時(shí)間:2017-06-02 10:34:53瀏覽次數(shù):97次

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人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞;EA.hy926操作步驟
培養(yǎng)的前一周內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題, 客戶可憑細(xì)胞的照片以及書面形式的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程提供給我公司。 經(jīng)公司技術(shù)人員核實(shí)認(rèn)定為可以予以重發(fā)的情況,由公司再免費(fèi)提供一次細(xì)胞。

公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、技術(shù)培訓(xùn)、人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞;EA.hy926操作步驟
售后服務(wù),其細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫(kù),以及部分國(guó)內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞;EA.hy926操作步驟
形態(tài)特性  內(nèi)皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  在PEG脅迫下,將原代培養(yǎng)的人臍靜脈細(xì)胞與抗硫*的A549克隆株融合,構(gòu)建了人臍靜脈細(xì)胞株, EA.hy926。 融合子在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)并以八因子相關(guān)抗原篩選。 EA.hy926已經(jīng)過(guò)100次以上的群體倍增(PDLs)。 電鏡照片顯示W(wǎng)eibel-Palade小體的細(xì)胞質(zhì)分布以及組織特異性的細(xì)胞器,分化的內(nèi)皮細(xì)胞特性如血管生成,體內(nèi)平衡/血栓形成,血壓及炎癥反應(yīng)。 [PubMed: 6407019] [PubMed: 2079463]
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞;EA.hy926操作步驟
處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過(guò)滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無(wú)菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞;EA.hy926操作步驟
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
Anti-HSP-27   熱休克蛋白-27抗體 脫氫膽酸鈉 Sodium dehydrocholate
Anti-HSP-60   熱休克蛋白-60抗體 烏索去氧膽酸 UDCS
Anti-HSP-70    熱休克蛋白-70抗體  
Anti-HSP-90α   熱休克蛋白90α抗體 脫氧鵝膽酸 CDCA
Anti-HSP-90β    熱休克蛋白-90β 抗體  
anti-HtrA2/Omi   *蛋白酶/線粒體*蛋白酶抗體  
Anti-hTRT  omerase catalytic subunit   端粒酶抗體 蛋黃粉 Egg yolk powder
Anti-Human serumAnti-Human serum   兔抗人血清抗體抗血清 寒天 Agar
Anti-Hypothetical protein    hypothetical protein抗體  
anti-IAA  吲哚-3-乙酸抗體/植物生長(zhǎng)素抗體 瓊脂 Agar
anti-IAP-5   凋亡抑制因子5抗體 洋菜 Agar
Anti-IASPP   腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員抗體 細(xì)菌瓊脂粉 Bacto-Agar
Anti-ICAD  Caspase  激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑 牛膽汁粉 Bile powder of cow
Anti-IDE   胰島素降解酶抗體 豬膽汁粉 Bile powder of pig
Mouse Anti-influenza A virus nucleoprotein Monoclonal    鼠抗人禽流感A核蛋白單克隆抗體 脫氫牛膽粉 OX Bile dihydrate purified
Mouse Anti-influenza B virus nucleoprotein Monoclonal   鼠抗人禽流感B核蛋白單克隆抗體 小牛浸膏粉 Beef extract powder
Anti-IFABP   小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體  Meat extracts beef
Anti-IFITM1    干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體 酵母粉 Yeast extract powder
人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞;EA.hy926操作步驟
Anti-IFN-β Anti-human   干擾素-β抗體  
Anti-IFN-γ  鼠抗人干擾素-γ/IFN-gamma單克隆抗體 酵母浸膏 Yeast extract
Anti-IFN-γAnti-Human   干擾素-γ抗體 3號(hào)膽鹽 Bile salt No. 3
Anti-IFN-γAnti-mouse、rat   干擾素-γ抗體  5號(hào)膽鹽 Bile salt No. 5
Anti-IGC    兔抗非洲爪蟾IGC抗體 7號(hào)膽鹽 Bile salt No.7
Anti-IGF-1 R    胰島素樣生長(zhǎng)因子-I受體抗體 羊膽鹽 Bile salt from sheep
Anti-IGFBP-2    胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2抗體 牛膽鹽 Bile salt from ox
Anti-IGFBP-5/IBP5    胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-5抗體  
Anti-IGF-I   胰島素樣生長(zhǎng)因子-I抗體 豬膽鹽 Bile salt from pig
Anti-IGF-II   胰島素樣生長(zhǎng)因子-II抗體  
IGF-IIBP3   胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體 禽膽鹽 Bile salt from poultry
Anti-IKB β    KB抑制蛋白抗體 酸水解酪蛋白 Casein acid hydrolysate
Anti-IKB α    KB抑制蛋白α抗體  
Anti-IKI3 family protein   擬南芥IKI3抗體 酪蛋白水解物 Casamino acid
Anti-IL-10   白介素10抗體  
anti-IL-12   白介素12抗體 酶水解酪蛋白 Casein Hydrolysate
Anti-IL-13   白介素13抗體  
anti-IL-16/LCF   白細(xì)胞介素-16抗體 豆蛋白質(zhì) Soy protein isolate
Anti-IL-17   白介素-17抗體 水解乳蛋白 Lactalbumin hydrolysate
Anti-IL-18/IGIF   白細(xì)胞介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子抗體  
Anti-IL1RAPL1    白介素受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白抗體 小牛血清 Calf serum
Anti-IL-1α    白介素1α抗體 標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清 Fetal bovine serum(Characterized FBS)
Anti-IL-1β   白介素1β抗體 優(yōu)級(jí)胎牛血清 Fetal bovine serum(Characterized FBS)
Anti-IL-2    白介素2抗體  
Anti-IL-2   鼠抗人白細(xì)胞介素-2抗體 特級(jí)胎牛血清 Fetal bovine serum(Defined FBS)
Anti-IL-23   白介素-23抗體  
Anti-IL-4   白介素4抗體 新生牛血清 New born calf serum
Anti-IL-6  Human   白介素6 馬血清 Horse serum
Anti-IL-6  mouse、rat   白介素6抗體 無(wú)菌綿羊血清 Sterile Defidrinated Sheep Blood
Anti-IL-8rat mouse   白介素8抗體 無(wú)菌雞血清 Sterile Defidrinated Chicken Blood
Anti-ILK-1    整合素連接激酶-1抗體  
anti-ING1/p33   生長(zhǎng)抑制因子基因1抗體 無(wú)菌豬血清 Sterile Defidrinated Pig Blood
Anti-Inhibin α   抑制素α抗體  
Anti-Insulin Receptor-α   胰島素受體-α抗體 無(wú)菌兔血清 Sterile Defidrinated Rabbit Blood
Anti-Insulin   胰島素1-51蛋白抗體  
Anti-Integrin α3β1   整合素α3β1抗體 無(wú)菌小鼠血清 Sterile Defidrinated Mouse Blood
Anti-Integrin α4β7/LPAM-1    整合素α4β7抗體  
anti-Integrin avb3   整合素avb3抗體 無(wú)菌豚鼠血清 Sterile Defidrinated Guinea pig Blood
Anti-Integrin αE2/CD103  整合素αE2抗體 大豆* SPC
 

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