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進(jìn)口原裝elisa試劑盒原位雜交防止污染

時(shí)間:2017-11-15閱讀:104
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進(jìn)口原裝elisa試劑盒防止污染:
由于在手指皮膚及實(shí)驗(yàn)室用玻璃器皿上均可能含有RNA酶,為防止其污染影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,在整個(gè)雜交前處理過程中都需要戴消毒手套,實(shí)驗(yàn)所用玻璃器皿及鑷子都應(yīng)于實(shí)驗(yàn)前一*高溫烘烤(180℃)以達(dá)到消除RNA酶的目的。雜交前及雜交時(shí)所用的溶液均需經(jīng)高壓消毒處理。
雙鏈DNA探針和靶DNA的變性:
雜交反應(yīng)進(jìn)行時(shí),探針和靶核酸都必須是單鏈的。如果用雙鏈DNA探針進(jìn)行雜交(包括檢測RNA時(shí)),雙鏈DNA探針在雜交前必須進(jìn)行變性。探針變性后要立即進(jìn)行雜交反應(yīng),不然解鏈的探針又會重新復(fù)性。
雜交液:
ELISA試劑盒雜交液內(nèi)除含一定濃度的標(biāo)記探針外,還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛血清白蛋白及載體DNA或RNA等。
雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加,可以減低探針與組織標(biāo)本之間的靜電結(jié)合。甲酰胺可使Tm降低,雜交液中含每1%的甲酰胺可分別使RNA:RNA,RNA:DNA,DNA:DNA的雜交溫度降低0.35℃,0.5℃和0.65℃。所以,雜交液中加入適量的甲酰胺,可避免因雜交溫度過高而引起的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞以及標(biāo)本的脫落。硫酸葡聚糖能與水結(jié)合,從而減少雜交液的有效容積,提高探針有效濃度,以達(dá)到提高雜交率的目的(尤其對雙鏈核酸探針)。在雜交液中加入牛血清白蛋白及載體DNA或RNA等,都是為了阻斷探針與組織結(jié)構(gòu)成分之間的非特異性結(jié)合,以減低背景。
進(jìn)口原裝elisa試劑盒探針的濃度:
探針濃度依其種類和實(shí)驗(yàn)要求略有不同,一般為0.5-5.0μg/ml(0.5-5.0ng/μl)。Z適宜的探針濃度要通過實(shí)驗(yàn)才能確定。
探針的長度:
一般應(yīng)在50-300個(gè)堿基之間,Z長不宜超過400個(gè)堿基。探針短易進(jìn)入細(xì)胞,雜交率高,雜交時(shí)間短。
250    Brilliant Green Agar w/Sulfadiazine    用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)    煌綠黃胺嘧啶瓊脂
250    Salmonella Shigella Agar    用于沙門氏菌,志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))    SS 瓊脂    
250    MSRV Medium,Modified    用于沙門氏的分離培養(yǎng)(MERCK方法)    改良MSRV培養(yǎng)基
250    Lactobacillus Selective Agar    用于乳酸菌檢測和分離培養(yǎng)(ACUMEDIA)    乳酸桿菌選擇性瓊脂
250    APT Agar    用于乳酸菌分離培養(yǎng)    APT 瓊脂
250克    LBS Agar    用于乳酸桿菌的檢測    乳酸菌選擇性瓊脂
250    Tyrobutyricum Broth Base    用于乳酪產(chǎn)品中梭菌的計(jì)數(shù)(Merck方法)    TBB 培養(yǎng)基
250    Egg Yolk Agar Base    用于肉毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))    卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)    
進(jìn)口原裝elisa試劑盒

 

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