ATCC細胞分離液快速操作說明和使用及保存中的注意事項:
注意:1,分離液和所分離樣本一定在20℃水浴箱中復溫20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在20℃±2℃時分離效果。
2,使用無靜電反應(yīng)的離心管,*使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管。
3,所有操作過程一定要在無菌條件下進行。
4,*抗凝劑選擇:EDTA、枸櫞酸、肝素。應(yīng)注意在血液稀釋過程中應(yīng)去除抗凝劑
體積。
A. 小量分離-使用1-2ml新鮮抗凝血,骨髓,臍帶血:
1,取新鮮抗凝血1-2ml,與全血及組織勻漿稀釋液(Cat#:2010C1119)1:1 混勻;
2,小心加于與混合液等體積的細胞分離液之液面上;
3,以400g(約1500 轉(zhuǎn)/分)離心15 分鐘(半徑15cm 水平轉(zhuǎn)子);
此時離心管中由上至下細胞分為四層。*層;為血漿層。第二層;為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層;為透明分離液層。第四層;為紅細胞層。收集第二層細胞放入含4-5ml 細胞洗滌液(Cat#:2010X1118)的試管中,充分混勻后,以1800 轉(zhuǎn)/分離心20 分鐘,棄去上清留沉淀細胞重新懸起。重復洗滌2 次即得所需細胞。
B. 中量分離-使用5-10ml新鮮抗凝血,骨髓,臍帶血:
1,取新鮮抗凝血5-10ml,與全血及組織勻漿稀釋液(Cat#:2010C1119)1:1 混勻;
2,將混合液小心疊加于細胞分離液之液面上;(混合液:分離液=2:1)
3,以500g(約1800 轉(zhuǎn)/分)離心15 分鐘(半徑15cm 水平轉(zhuǎn)子);
此時離心管中由上至下ATCC細胞分為四層。*層;為血漿層。第二層;為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層;為透明分離液層。第四層;為紅細胞層。收集第二層細胞放入含10ml 細胞洗滌液(Cat#:2010X1118)的試管中,充分混勻后,以1800 轉(zhuǎn)/分離心20 分鐘,棄去上清留沉淀細胞重新懸起。重復洗滌2 次即得所需細胞。
100290-201002 含量測定 100mg *
100291-200402 HPLC法含量測定 100mg *
100292-200201 含量測定 50mg *
100294-200602 含量測定 100mg *
100296-200303 HPLC法含量測定 1000mg *鈉
100298-201002 含量測定 100mg α-*
100299-200001 鑒別用 50mg *
100300-200001 含量測定 50mg *
100301-199901 含量測定 50mg 阿司咪唑
100302-200602 含量測定 100mg *
ATCC細胞
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