當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>公司動態(tài)>>ATCC細(xì)胞貼壁速度慢
根據(jù)ATCC細(xì)胞比成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基貼壁速度慢的特點,并結(jié)合使用不加血清的營養(yǎng)液,把含有兩類細(xì)胞的細(xì)胞懸液反復(fù)貼壁,使兩類細(xì)胞相互分離,操作方法與傳代相同。
細(xì)胞離體后,失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響,生活在缺乏動態(tài)平衡相對穩(wěn)定環(huán)境中,易發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象減弱;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡;或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性,變成可無限生長的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。因此,培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體,它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能,也有一些不同于體內(nèi)細(xì)胞的性狀。實際上從細(xì)胞一旦被置于體外培養(yǎng)后,這種差異就開始發(fā)生了。
(1)待細(xì)胞生長達(dá)一定數(shù)量后,倒出舊培養(yǎng)液,用*消化后,Hanks 沖洗2次,加入不含血清的培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液;
(2)取編號為此A、B、C三個培養(yǎng)瓶;首先把懸液接種入A培養(yǎng)瓶中。置溫箱中靜止培養(yǎng)5~20分鐘后,輕輕傾斜培養(yǎng)瓶,讓液體集中瓶角后慢慢吸出全部培養(yǎng)液,再接種入B培養(yǎng)瓶中后;向A瓶中補充少許*培養(yǎng)液置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng);
(3)培養(yǎng)B瓶中細(xì)胞5~20分鐘后,接處理A的方法,把培養(yǎng)液注入C培養(yǎng)瓶中;再向B瓶中補加*培養(yǎng)基。
當(dāng)三個瓶內(nèi)都含有ATCC細(xì)胞培養(yǎng)液后,均在溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如操作成功,次日觀察可見A瓶主要為成纖維細(xì)胞,B瓶兩類細(xì)胞相雜,C瓶可能主要為癌細(xì)胞。必要時可反復(fù)處理多次,直至癌細(xì)胞純化為止。
對照品 α-對羥基苯* 30mg 對照品
對照品 *二醇物 50mg 對照品
對照品 * 200mg 對照品
標(biāo)準(zhǔn)試劑 乙酰苯胺 200 標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑 *酶 2ml 標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑 咪唑試劑 100g 標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑 對乙酰氨基苯甲醚 200mg 標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑 庚烷磺酸鈉 5g 標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑 3-乙氧基-4-羥基苯甲醛 100mg 標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑 2-苯乙酰胺 65mg 標(biāo)準(zhǔn)試劑
ATCC細(xì)胞
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