當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>公司動態(tài)>>人源細(xì)胞消化的方法
一、人源細(xì)胞酶消化法。
1、*。這是用得zui多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的*作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時不能用含鈣、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。
2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。
二、離子螯合劑:不破壞細(xì)胞表面分子,僅與CAMs螯合,因此,如果檢測細(xì)胞表面分子的話,盡量,甚至是一定不要用酶消化法。
1、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。
2、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實比較強。
三、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。
四、冷凍法。這是本人做細(xì)胞培養(yǎng)時發(fā)現(xiàn)的方法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是人源細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5ml 4度的PBS,靜置操作臺上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即*脫落。
125mg Cabergoline 81409-90-7 卡麥角林標(biāo)準(zhǔn)品
125mg Brompheniramine Maleate 980-71-2 *標(biāo)準(zhǔn)品
125mg Bisacodyl 603-50-9 *標(biāo)準(zhǔn)品
125mg Betamethasone Dipropionate 5593-20-4 丙酸*標(biāo)準(zhǔn)品
125mg Benazepril Hydrochloride 86541-74-4 *標(biāo)準(zhǔn)品
125mg Articaine Hydrochloride 23964-57-0 *標(biāo)準(zhǔn)品
125mg Arginine Hydrochloride 1119-34-2 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品
125mg Ampicillin Sodium 69-52-3 氨芐*鈉標(biāo)準(zhǔn)品
125mg Aminosalicylic Acid 65-49-6 *標(biāo)準(zhǔn)品
125mg Acebutolol Hydrochloride 34381-68-5 鹽酸醋丁洛爾標(biāo)準(zhǔn)品
125mg 1397-89-3 *標(biāo)準(zhǔn)品
人源細(xì)胞
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。