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人源細(xì)胞同時(shí)檢測(cè)多個(gè)指標(biāo)

時(shí)間:2018-1-29閱讀:79
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確認(rèn)人源細(xì)胞儀能檢測(cè)多少個(gè)通道,流式抗體每個(gè)通道只能選擇1種熒光素。各個(gè)通道之間的熒光素可以隨意搭配。如實(shí)驗(yàn)者同時(shí)檢測(cè)三個(gè)指標(biāo),可以在下圖中綠色、黃色和紅色三個(gè)通道中各選一個(gè)適當(dāng)?shù)臒晒馑貥?biāo)記,F(xiàn)ITC、PE和PE-cy5。切忌所有指標(biāo)選擇同一個(gè)通道的熒光標(biāo)記,以防止熒光的重疊和相互干擾,影響zui后結(jié)果。因此,流式細(xì)胞儀的通道越多,同一份樣本能同時(shí)做的表面/胞內(nèi)標(biāo)志就越多。常用熒光標(biāo)記包括FITC, PE, PEcy5, PEcy5.5, APC等。
在流式實(shí)驗(yàn)過程中,盡量減少實(shí)驗(yàn)工序和過程,以保證實(shí)驗(yàn)的真實(shí)和準(zhǔn)確性。因此在條件允許的范圍內(nèi),建議盡量用直接標(biāo)記的抗體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)而不去做間接標(biāo)記。
同型對(duì)照的選擇:
人源細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和其他抗體相關(guān)實(shí)驗(yàn)有點(diǎn)不同的就是需要選擇同型對(duì)照。同型對(duì)照,是用于消除由于抗體非特異性結(jié)合到細(xì)胞表面而產(chǎn)生的背景染色,相當(dāng)于實(shí)驗(yàn)的陰性對(duì)照。同型對(duì)照選擇與標(biāo)記抗體同種屬來源,同亞型,同熒光標(biāo)記的抗體。比如:抗人的CD3的PE標(biāo)記的抗體,小鼠的IgG2a。同型對(duì)照選擇PE標(biāo)記的小鼠的IgG2a。
5-Methoxypsoralen    ≥99%    佛手柑內(nèi)酯,香柑內(nèi)酯,5-甲氧基補(bǔ)骨脂素
L-Carnitine inner salt    98%    左旋肉堿
cyanidin-3-O-glucoside    HPLC≥98%    矢車菊素-3-0-葡糖糖苷
Cyanidin Chloride    HPLC≥94%    氯化矢車菊素
5-HTP    HPLC≥98%    5-羥色胺酸(5-HTP)
Sec-O-Glucosylhamaudol    HPLC≥98%    亥茅酚苷
Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside    HPLC≥98%    異鼠李素-3-O-新*
(+)-Corynoline    HPLC≥98%    紫蓳靈; 紫堇醇靈堿
(±)-Maackiain; dl- Maackiain    HPLC≥98%    高麗槐素; 馬卡因
Fraxin;Fraxoside; Paviin    HPLC≥98%    秦皮苷; 白蠟樹苷
人源細(xì)胞

 

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