當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>公司動態(tài)>>不同的人源細(xì)胞結(jié)構(gòu)更容易染色
人源細(xì)胞固定的目的是用人為的方法盡可能使組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分保持生活狀態(tài),防止組織細(xì)胞死后發(fā)生自溶。固定還能增加組織塊硬度,使其更容易切片,使不同的結(jié)構(gòu)更容易染色。
固定方法有物理固定和化學(xué)固定兩類,物理固定可采用空氣干燥(血涂片)、驟冷(在液氮中迅速冷凍)或微波固定等;化學(xué)固定有浸潤法(immersion method)和灌流法(perfusion method)。灌流法適用于動物實(shí)驗(yàn)中對缺氧敏感的器官,如神經(jīng)系統(tǒng)和胃腸等取材。
一、浸潤法
浸潤法是組織化學(xué)和免疫 組織化學(xué)常用的固定方法,一次要處理許多組織樣品時(shí)也多用此法。
預(yù)先需估計(jì)固定劑的用量,并在取材前配好固定液,分裝于小容器內(nèi),在容器上標(biāo)記組別和取材時(shí)間。容器內(nèi)放人記錄組織類型的紙條,以便包埋時(shí)辨認(rèn)。固定液的用量應(yīng)是樣品的40倍,以保證組織充分固定。固定時(shí)間可根據(jù)所選固定液和組織類型而定。
若進(jìn)行酶組織化學(xué)染色,應(yīng)在4℃短時(shí)間固定,固定時(shí)間長會導(dǎo)致酶活性減弱,甚至消失。
二、灌流固定法
此法血管途徑,將固定液灌注到欲固定的器官內(nèi),使生活的細(xì)胞在原位及時(shí)迅速固定,取下組織之后再浸入相同的固定液內(nèi)繼續(xù)固定。
灌流固定時(shí)大動物多采用輸液方式,將固定液從一側(cè)頸總動脈或股動脈輸入,從另一側(cè)切開靜脈放血,輸入固定液與放血同時(shí)進(jìn)行。固定液的輸人量因個(gè)體不同而異,即500―2000ml不等。
小動物多采用心臟主動脈灌流,如大鼠和小鼠,在吸人 深度麻醉情況下,打開胸腔,縱向切開*,并用紗線在動脈弓下打一松結(jié),然后用*從左心室向主動脈方向刺人,針刺人后,隨即將紗線扎緊固定,勿使其移動,再將右心*開放血。人源細(xì)胞在灌注固定液前,先用含抗凝劑的37℃生理鹽水灌流,沖洗血管內(nèi)的血液,防止血液凝固阻塞血管??鼓齽┏S酶嗡?,劑量為40mg/L沖洗液。肝臟顏色由鮮紅變?yōu)闇\白色時(shí),即可灌流固定液,灌注速度為5~10ml/min,應(yīng)在30分鐘內(nèi)結(jié)束灌注并取材,而后將組織浸入相同的固定液中1~3小時(shí)。灌流固定對組織結(jié)構(gòu)和酶活性保存較好。
748812-53-5 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
76811-98-8 非索非那定相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
791-28-6 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
79617-89-3 *外消旋混合物標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
821-48-7 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
82240-09-3 2E, 4E-己二烯酸異丁酰胺標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
82419-52-1 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
85933-17-3 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
86150-61-0 萬乃洛韋相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
人源細(xì)胞
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