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人源細(xì)胞實(shí)驗(yàn)失敗的主要原因

時(shí)間:2017-11-20閱讀:101
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消毒和滅菌微生物污染是造成人源細(xì)胞失敗的主要原因:
物理消毒法
  1.紫外線消毒:紫外線是一種低能量的電磁輻射,可殺死多種微生物。革蘭陰性菌zui為敏感,其次是陽(yáng)性菌,再次為芽孢,真菌孢子的抵抗力zui強(qiáng)。紫外線的直接作用是通過(guò)破壞微生物的核酸及蛋白質(zhì)等而使其滅活,間接作用是通過(guò)紫外線照射產(chǎn)生的臭氧殺死微生物。直接照射培養(yǎng)室消毒,用法簡(jiǎn)單,效果好。
  紫外燈的消毒效果同紫外燈的輻射強(qiáng)度和照射劑量呈正相關(guān),輻射強(qiáng)度隨燈距離增加而降低,照射劑量和照射時(shí)間呈正比。因此紫外燈同被照射物的距離和照射時(shí)間要適合。離地面2米的30W燈可照射9平方米房間,每天照射2-3小時(shí),期間可間隔30分鐘。燈管離地面2米以外要延長(zhǎng)照射時(shí)間,2.5米照射效果較差。紫外燈照射工作臺(tái)的距離不應(yīng)超過(guò)1.5米,照射時(shí)間30分鐘為宜。
  紫外燈不僅對(duì)皮膚、眼睛傷害,且對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞與試劑等也產(chǎn)生不良影響,因此,不要開(kāi)著紫外等操作。
  3.高溫濕熱滅菌:壓力蒸汽滅菌是zui常用的高溫濕熱滅菌方法。對(duì)生物材料有良好的穿透力,能造成蛋白質(zhì)變性凝固而使微生物死亡。布類、物、璃器皿、屬器皿、膠和某些培養(yǎng)液都可以用這方法滅菌。
  不同壓力蒸汽所達(dá)到的溫度不同,不同消毒物品所需的有效消毒壓力和時(shí)間不同。從壓力蒸汽消毒器中取出消毒好的物品(不包括液體),應(yīng)立即放到60-70℃烤箱內(nèi)烘干,再貯存?zhèn)溆?,否則,潮濕的包裝物品表面容易為微生物污染。煮沸消毒也是常用的濕熱消毒方法,它具有條件簡(jiǎn)單、使用方便等特點(diǎn)。
 4.高溫干熱消毒:干熱滅菌主要是將電熱烤箱內(nèi)物品加熱到160℃以上,并保持90-120分鐘,殺死細(xì)菌和芽孢,達(dá)到滅菌目的。主要用于滅菌玻璃器皿(如體積較大的燒杯、培養(yǎng)瓶)、金屬器皿以及不能與蒸汽接觸的物品(如粉劑、油劑)。
  干熱滅菌后要關(guān)掉開(kāi)關(guān)并使物品逐漸冷卻后在打開(kāi),切忌立即打開(kāi),以免溫度驟變而使箱內(nèi)的玻璃器皿破裂。干烤箱內(nèi)物品間要有空隙,物品不要靠近加熱裝置。
  燒灼也是滅菌方法之一,常利用臺(tái)面上的酒精燈的火焰對(duì)金屬器皿及玻璃器皿口緣進(jìn)行燒灼消毒。
  5.人源細(xì)胞過(guò)濾除菌:是將液體或氣體用微孔薄膜過(guò)濾,使大于孔徑的細(xì)菌等微生物顆粒阻留,從而達(dá)到除菌目的。在體外培養(yǎng)時(shí),過(guò)濾除菌大多用于遇熱容易變性而失效的試劑或培養(yǎng)液。
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