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血清中的沉淀物對細(xì)胞培養(yǎng)的影響

時(shí)間:2017-4-28閱讀:232
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(1)ATCC細(xì)胞生長,我們的試驗(yàn)以及經(jīng)驗(yàn)表明沉淀物不會影響細(xì)胞培養(yǎng),我們的客戶以及其它血清生產(chǎn)商也證明了這一點(diǎn)。

(2)過濾,如果血清中出現(xiàn)大量的沉淀物,血清將很難過濾。一般說來,因?yàn)樵谘迳a(chǎn)時(shí)zui后已經(jīng)經(jīng)過100nm或者40nm的過濾處理,并且經(jīng)過了嚴(yán)格的無菌檢測,因此不*再過濾用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清。在實(shí)驗(yàn)室中沒有必要再過濾處理血清,在大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)中往往將血清直接加到培養(yǎng)基中一起過濾。

3)污染,磷酸鈣往往被誤認(rèn)為微生物污染而引起爭端。研究者可能會在血清中觀察到一些絮狀的沉淀,因此就會比較警覺的去做無菌試驗(yàn),將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天,結(jié)果可能會觀察到更多的絮狀沉淀,因此就斷定血清被污染了。并且當(dāng)研究者將血清樣品放在倒置顯微鏡下觀察時(shí)往往可以看到一些可以運(yùn)動的小黑點(diǎn),因此就更加確認(rèn)是血清被污染了。于是,ATCC細(xì)胞研究者就會花費(fèi)更多的時(shí)間和精力來和生產(chǎn)商確認(rèn),但zui終確定血清沒有被污染而只是沉淀。為了避免這些問題的發(fā)生,我們建議不要直接將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察是否有菌,而是將血清加到瓊脂板上進(jìn)行培養(yǎng)以觀察是否有細(xì)菌生長。另外,也可以進(jìn)行革蘭氏染色,在油鏡下觀察,以確認(rèn)是否有污染。

首先要注意正確的血清解凍步驟,而且溶解過程中一定要每隔一段時(shí)間均勻而緩慢的搖動血清。我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在下列情況下沉淀物可能增加,使用中應(yīng)該盡量避免:(1)熱滅活血清;(2)在37℃下培養(yǎng)血清;(3)反復(fù)凍融;(4)γ射線照射;(5)*儲存在2-8℃;(6)ATCC細(xì)胞在室溫下放置時(shí)間過長

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