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99次懸浮細胞的染色:
(1)收獲正常和誘導凋亡的細胞(0.5~1′106),PBS洗2次,1000rpm′10min。
(2)3%多聚甲醛冰浴10min,PBS洗2次,1000rpm′10min。
(3)加入PBS-T溶液,37°C孵育15min,PBS洗2次,1000rpm′10min。
(4)加入200ml胎牛血清,室溫反應30min。
(5)加入5ml FITC標記的TFAR19單抗(終濃度為1:40),4°C反應30min
(6)熒光細胞洗液洗2次,1000rpm′10min。
結果觀察:將細胞沉淀滴片,熒光顯微鏡及共聚焦激光顯微鏡下觀察TFAR19在細胞中的定位。同時用流式細胞計定量檢測TFAR19蛋白的平均熒光強度。
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