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病毒轉(zhuǎn)染小鼠細(xì)胞（PT-67）-化學(xué)試劑

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更新時(shí)間：2017-07-26 11:51:06瀏覽次數(shù)：263次

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小鼠源性細(xì)胞

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上海機(jī)純實(shí)業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

產(chǎn)地	國(guó)產(chǎn)	加工定制	是
適用領(lǐng)域	科研

病毒轉(zhuǎn)染小鼠細(xì)胞（PT-67）是我公司重點(diǎn)推廣產(chǎn)品，我們有專業(yè)的技術(shù)人員全程指導(dǎo)，請(qǐng)放心購(gòu)買(mǎi)，發(fā)貨時(shí)均會(huì)附上質(zhì)檢報(bào)告單、使用說(shuō)明書(shū)和*用法用量，提供正規(guī)發(fā)票。

詳細(xì)介紹

病毒轉(zhuǎn)染小鼠細(xì)胞(PT-67)
細(xì)胞介紹
PT-67細(xì)胞是源于TK-MH/3T3的逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞。PT67isaretrovirus packagingcelllinederived fromTK-NIH/3T3cells.細(xì)胞產(chǎn)生可結(jié)合長(zhǎng)臂猿白血病病毒受體Glvr-1或雙嗜性逆轉(zhuǎn)錄病毒受體Ram-1的復(fù)制缺陷逆轉(zhuǎn)錄病毒載體顆粒。

細(xì)胞特性
1)來(lái)源：小鼠成纖維細(xì)胞
2)形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)
3)含量：>lxl06個(gè)/mL
4)污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺(tái)棄去上清，加入*使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至l0cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
病毒轉(zhuǎn)染小鼠細(xì)胞(PT-67)細(xì)胞用途：僅供科研使用。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1.準(zhǔn)備 DMEM-H 培養(yǎng)基(DMEM-H，GIBC0,貨號(hào)12800017,添加 NaHC031.5g/L)，90%;胎牛血清，10%。（DMEM液體培養(yǎng)基：GIBCO，11995-065)。
2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3.凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

2)細(xì)胞處理：
復(fù)蘇細(xì)胞：將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入l0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37°C培
養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約lml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

病毒轉(zhuǎn)染小鼠細(xì)胞(PT-67)注意事項(xiàng)：
收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們。
所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

關(guān)鍵詞：培養(yǎng)箱顯微鏡