上海機(jī)純實業(yè)有限公司
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
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更新時間:2017-07-25 16:49:20瀏覽次數(shù):207次
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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
小鼠T淋巴細(xì)胞(CTLL-2)是我公司重點推廣產(chǎn)品,我們有專業(yè)的技術(shù)人員全程指導(dǎo),請放心購買,發(fā)貨時均會附上質(zhì)檢報告單、使用說明書和*用法用量,提供正規(guī)發(fā)票。
小鼠T淋巴細(xì)胞(CTLL-2)
細(xì)胞介紹
該細(xì)胞是源自C57BL/6的細(xì)胞毒性的T淋巴細(xì)胞,其生長依賴IL-2。
細(xì)胞特性
1)來源:T細(xì)胞
2)形態(tài):懸浮生長
3)含量:>lxl06個/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入* 使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至l0cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
小鼠T淋巴細(xì)胞(CTLL-2)細(xì)胞用途:僅供科研使用。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備 RPIVM-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號 21875-091),80%;補充 2mM的L-*,ImM的丙酮酸鈉;另外添加250U/mlrmlL-2(recombinantmouseInterleukin 2),添加ConA的T-STIM (BDPharmingen,貨號354115),10%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入l0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢 查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養(yǎng)液后吹句,將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
小鼠T淋巴細(xì)胞(CTLL-2)注意事項:
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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