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簡述ELISA試驗與操作使用

閱讀:82發(fā)布時間:2018-3-2

ELISA試劑盒可用于測定抗原,也可用于測定抗體,ELISA試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。由于其試劑不亂、易保存,操作簡潔,成果斷定較客觀等要素,已廣泛應用在免疫學檢修的各領域中。但是,影響ELISA試驗成果的要素良多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量確保才干充沛發(fā)揮其辦法學的利益。ELISA試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的試驗確診辦法。參加酶反響的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)品,產(chǎn)品的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。再參加酶符號的抗原或抗體,也經(jīng)過反響而結合在固相載體上。ELISA的根底是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號,此刻固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈必定的份額。用洗刷的辦法使固相載體上構成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分隔。由于酶的催化功率很高,間接地擴大了免疫反響的成果,使測定辦法到達很高的敏感度。在測守時,受檢標本(測定其間的抗體或抗原)與固相載體外表的抗原或抗體起反響。結合在固相載體外表的抗原或抗體仍堅持其免疫學活性,酶符號的抗原或抗體既留存其免疫學活性,又留存酶的活性。 
ELISA試劑盒操作注意事項:
1. 試劑應按標簽闡明書貯存,運用前康復到室溫。稀稀往后的規(guī)范品應丟掉,不可保存。
2. 試驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,防止蛻變。
3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前運用。
4. 運用一次性的吸頭防止交叉污染,汲取終止液和底物A、B液時,防止運用帶金屬部分的加樣器。
5. 運用潔凈的塑料容器裝備洗刷液。運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗刷酶標板時應充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反響孔中吸水。
7. 底物A應揮發(fā),防止*打開蓋子。底物B對光敏感,防止*露出于光下。防止用手觸摸,有毒。試驗完成后應立即讀取OD值。
8. 參加試劑的次序應共同,以確保一切反響板孔溫育的時刻相同。
9. 依照闡明書中標明的時刻、加液的量及次序進行溫育操作。

 


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