1.ELISA試劑盒將抗原抗體反應(yīng)固相化：即試驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié)，使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無選擇性地吸附蛋白分子。Elisa試劑盒此物理性吸附不損壞蛋白分子結(jié)構(gòu)，Elisa試劑盒堅(jiān)持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性；
2.封閉：固相吸附蛋白對(duì)錯(cuò)特異性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面依然有吸附其它蛋白的才干，為了確?？乖贵w反應(yīng)的特異性，因而，包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉。通常以為牛血清白蛋白是zui為抱負(fù)的封閉劑，也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清代替。
3.抗原抗體反應(yīng)：ELISA試劑盒抗原或抗體在恰當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進(jìn)行特異的抗原抗體反應(yīng)。
4.酶反應(yīng)：酶可以通過共價(jià)鍵與抗原或抗體銜接構(gòu)成聯(lián)絡(luò)物，當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時(shí)分，被查看靶政策中也聯(lián)絡(luò)了酶分子。
5.底物反應(yīng)：聯(lián)絡(luò)在抗原抗體中的酶分子，Elisa試劑盒可以促進(jìn)底物發(fā)作顏色反應(yīng)，查看人員可以裸眼查詢，可以通過顏色來斷定是不是有免疫反應(yīng)的存在，通過顏色的深淺判別標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量，也可借用酶標(biāo)儀在恰當(dāng)?shù)牟ㄩL讀取吸光度值。
ELISA試劑盒的基本原理便是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng)，并通過酶催化底物發(fā)作化學(xué)改變將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的方式顯現(xiàn)出來。
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