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ELISA試劑實(shí)驗(yàn)血清和血漿的選擇

閱讀:97發(fā)布時(shí)間:2017-12-27


ELISA試劑盒技術(shù)20世紀(jì)80年代引進(jìn)我國,現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用。與之相關(guān)的分析儀器也得到了快速開展,我國先后出現(xiàn)了十余家酶標(biāo)儀、洗板機(jī)生產(chǎn)廠商,在我國市場(chǎng)上與很多的進(jìn)口酶標(biāo)儀器進(jìn)行嚴(yán)重競(jìng)賽。下面分三個(gè)方面對(duì)中有關(guān)儀器及其在我國的應(yīng)用作一扼要介紹。 其他基質(zhì)不能運(yùn)用。
ELISA試劑盒血清和血漿中總蛋白和鹽的濃度適當(dāng)安穩(wěn),但尿液中鹽濃度則改變較大,鹽濃度添加對(duì)抗原抗體間反響起一個(gè)抑制作用。 ELISA試劑盒如果樣本體積小于總反響體積的10%~15%,則蛋白的影響不明顯,但有時(shí)為進(jìn)步測(cè)定的敏感性,常需一個(gè)較大的樣本體積。因而,要求參閱辦法具有低的測(cè)定下限,且樣本體積對(duì)總反響體積應(yīng)小至足以掃除大部分基質(zhì)效應(yīng)。
ELISA試劑盒樣本中的免疫球蛋白可通過與測(cè)定中所運(yùn)用的特異抗體發(fā)作反響而影響測(cè)定結(jié)果。如本身免疫病患者常有可與抗體反響的類風(fēng)濕因子(RF)針對(duì)動(dòng)物免疫球蛋白的嗜異性天然抗體適當(dāng)普遍,但一般情況下其濃度和親和力較低。本身抗體和嗜異性天然抗體的存在一般會(huì)引起假陽性反響。這些攪擾可通過參加足量的來自同一種系的免疫球蛋白而減小,也可在測(cè)定中運(yùn)用抗體的Fab或 ELISA試劑盒2片段替代完整抗體來減小攪擾,但如果樣本含有針對(duì)試劑抗體的個(gè)別基因型(idiotype)抗體,則這種辦法無效。這種情況下只要將免疫球蛋白從樣本中去除或運(yùn)用一個(gè)根據(jù)另一個(gè)抗體的辦法測(cè)定。


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