ELISA試劑盒在酶聯(lián)固相免疫試驗(yàn)中，尤其在簡介ELISA法中，經(jīng)常會(huì)碰到陰性本底的問題。主要是本底過高和不同標(biāo)本的本底值差異較大。本底或稱布景，是ELISA中的非特異性顯色。底物未經(jīng)過酶效果而呈現(xiàn)的色彩稱為空白。底物液如制造不當(dāng)會(huì)呈現(xiàn)必定的空白值。這個(gè)空白值只需不太高（A＜0.05），可從個(gè)測定值中減除，并不影響試驗(yàn)成果。這兒研討的是不含待測抗原或抗體的陰性標(biāo)本在ELISA中呈現(xiàn)的本底。從理論上講，只有陽性標(biāo)本終究才能引出顯色反響，在以下狀況會(huì)呈現(xiàn)本底。
固相載體的吸附
在酶免疫測定中，ELISA試劑盒的特點(diǎn)是使用固相載體作為分離游離和結(jié)合的酶結(jié)合物的手法。固相載體與吸附在其上的抗原會(huì)抗體構(gòu)成固相抗原或固相抗體，即免疫吸附劑（Immu-nosorbent）。一般所用的固相載體聚苯乙烯其外表主要是疏水基團(tuán)，經(jīng)過疏水鍵與蛋白質(zhì)結(jié)合。之中吸附式物理性的非特異性吸附，盡管蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等對(duì)吸附的量有必定的影響，但總的來說各種蛋白質(zhì)均能吸附在聚苯乙烯載體的外表。因而除在包被時(shí)有目的地使抗原或抗體吸附在載體上，在ELISA各個(gè)過程中均有可能發(fā)生攪擾物質(zhì)的吸附，使終究發(fā)生與受檢抗原-抗體反響無關(guān)的顯色，這是構(gòu)成本底的主要原因。
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