上海一研生物科研有限公司
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更新時間:2017-04-16 23:02:08瀏覽次數(shù):99次
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小鼠正常食管上皮細胞;MNEEC/HL-009圖片采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
細胞名稱 小鼠正常食管上皮細胞;MNEEC/HL-009圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
小鼠正常食管上皮細胞;MNEEC/HL-009圖片冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
小鼠正常食管上皮細胞;MNEEC/HL-009圖片操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
購買小鼠正常食管上皮細胞;MNEEC/HL-009圖片注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
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皮落青霉 Penicilliumcrustosum 枝孢霉 Cladosporiumsp.
酮戊二酸短桿菌 Brevibacteriumketoglutamicum 牛糞枝孢 Cladosporiumstercorarium
Aspergillusflavo-furcatis 黃叉曲霉 糞生枝孢 Cladosporiumstercoris
Fusariumsolani 腐皮鐮孢 異旋孢腔菌 Cochliobolusheterostrophus
產(chǎn)黃青霉 Penicilliumchrysogenum 禾旋孢腔菌 Cochliobolussativus
褐球固氮菌 Bacillusthuringiensissubsp.kumamotoensis 頂頭孢霉 Cephalosporiumacremonium
Flammulinavelutipes 毛柄金錢菌(金針菇) 頭孢霉 Cephalosporiumsp.
紫孢側耳(美味側耳) Pleurotussapidus 甘薯長喙殼 Ceratocystisfimbriata
小鼠正常食管上皮細胞;MNEEC/HL-009圖片Salmonellaanatum 鴨沙門氏菌 球毛殼菌 Chaetomiumglobosum
果形正青霉 Micromonosporaviolaceofusca 傘卷霉 Circinellaumumbellate
漢遜德巴利酵母 Colletotrichumgloeosporioides 蚜蟲枝孢 Cladosporiumaphidis
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