其它elisa試劑盒實驗封閉很重要
封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結合的機會。您當然也希望抗體只與目的蛋白結合吧。如果您的背景過高，懷疑封閉不充分，那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當延長封閉時間。
如果您一直被背景問題所困擾，那么也許您該花些時間來優(yōu)化封閉液。這可能需要時間，但也是值得的。目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個因素，包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、您的抗體和檢測試劑。好的封閉液應降低非特異性結合，但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。
zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定，在去除洗滌過程中的一些非特異結合上很有用。但它們只在存在時起作用，因為很容易被洗掉。因此所有洗滌液中也必須添加封閉液。請勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%），它會降低特異結合，產(chǎn)生假陰性。另一個選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液，后者可協(xié)助洗滌過程中的封閉。
蛋白封閉液則有所不同，是*的。它們與開放位點結合并封閉，同時穩(wěn)定與微孔板結合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白（BSA）、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過，它的缺點在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個問題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。
其它elisa試劑盒抗體濃度須優(yōu)化
我們通常會follow師兄師姐留下來的操作步驟，但是如果試劑稍有不同，則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住，非特異的抗體結合會增加背景。為了防止這一點，切勿使用過多的一抗或二抗。
檢測試劑要適量
另一點也很顯而易見：切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會導致高背景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時應加入終止液。
進口/國產(chǎn) 規(guī)格: Jatrorrhizine Hydrochloride 鹽酸藥根堿 20mg/支
進口/國產(chǎn) 白屈菜赤堿 規(guī)格: Chelerythrine 白屈菜紅堿 20mg/支
進口/國產(chǎn) 規(guī)格: Sanguinarine 血根堿 20mg/支
進口/國產(chǎn) 規(guī)格: Nitidine chloride 氯化兩面針堿 20mg/支
進口/國產(chǎn) 規(guī)格: Homoharringtonine * 20mg/支
進口/國產(chǎn) 克胺; 3-二甲氨基甲基吲哚; 格胺 規(guī)格: Gramine 蘆竹堿 20mg/支
進口/國產(chǎn) 蛇根草素; 蛇根堿; 血安平; 利舍平 規(guī)格: Reserpine * 20mg/支
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