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白介素elisa試劑盒告訴你激光共聚焦的前期步驟

閱讀:228發(fā)布時間:2017-7-25

1、白介素elisa試劑盒做細胞爬片(爬片的步驟就不詳述了),注意:洗片子的PBS和固定用的4%多聚甲醛一定要新鮮配制的(一周以內的都能用), 因為PBS和4%多聚甲醛放久了后,都會有自發(fā)熒光。
 
2、抗體的孵育:預實驗的時候熒光根據文獻和經驗設定一、二抗的濃度,一抗4度孵育過夜(時間8~12h);二抗(熒光抗體)孵育時要避光,孵育好后用PBS充分沖洗;可以將做好的片子直接在板子中孵育,如果從節(jié)約的角度來看,可以用12或24孔板比較好。
 
3、做好以上步驟后,將板子里放點PBS,保存片子濕潤,不要干片,這樣會影響細胞形態(tài)。
 
4、到激光共聚焦觀察室后,再將爬片取出,在干凈的載玻片上滴一滴50%的甘油,然后將爬片取出來倒扣在滴過甘油的載玻片上(即細胞在2層玻片之間,一定不要反了哦;還有千萬不要用中性樹膠封片!
 
5、白介素elisa試劑盒顯微鏡下觀察即可。
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