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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人白介素1β轉換酶(ICE)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human interleukin 1 converting enzyme (ICE) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11019 |
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
N-鈣粘附分子抗原 0.5mgN-cadherin
腦啡肽 0.5mgPENK/Enkephalin A(Preproencephalin A)
突觸相關膜蛋白25抗原 0.5mgSNAP-25 (synaptosomal-associated protein 25)
上游刺激因子1抗原 0.5mgUSF-1(upstream stimulatory factor 1)
DR3 死亡受體(抗原) 0.5mgDR3/TRAMP (death receptor-3)
中分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原) 0.5mgNF-M (Neurofilament triplet M)
干擾素-β抗原 0.5mgIFN- Beta (Interferon Beta)Anti-mouse,rat
雌二醇偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgEstradiol/BSA
神經(jīng)保護肽 0.5mgNeuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N)] Gly14)
熒光素標記人IgM 0.3mlhuman IgM/FITC
熒光素PE標記狗IgM 0.1mldog IgM/PE
熒光素Cy3標記兔IgM 0.1mlRabbit IgM/Cy3
羅丹明標記小鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.3mlMouse IgG/RBITC
兔子轉化生長因子β 96TTGF- Beta (Rabbit Transforming Growth factor Beta) ELISA Kit
人白介素1β轉換酶(ICE)ELISA檢測試劑盒1mL ATP溶液,1 mM ATP Solution,1 mM -20℃保存
10mL ONPG溶液,10mg/mL O-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside -20℃干燥避光保存
300次 β-半乳糖苷酶檢測試劑盒 β-galactosidase Assay Kit -20℃或-80℃避光保存
200次 ATP發(fā)光法細胞活力檢測試劑盒 ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit -20℃或-80℃避光保存
200次 ATP檢測試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
50 T ATP酶測試盒(組織及細胞膜不需高速離心) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
50 T ATP酶測試盒(組織及細胞膜需高速離心) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
200 mg Catalase(抗氧化酶) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
100次 CuZn/Mn-SOD活性檢測試劑盒(WST法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
50 T GSH—PX測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
100 T GSH—ST測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
共100次 GSH和GSSG試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
50 T GSH試劑盒(谷胱甘肽測試盒)(比色法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
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