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產(chǎn)地	進(jìn)口	加工定制	是
適用領(lǐng)域	科研

樣品收集、處理及保存：
1）.人骨保素（OPG）試劑盒說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人骨保素（OPG）試劑盒說(shuō)明書檢測(cè)范圍：人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動(dòng)物細(xì)胞因子、植物細(xì)胞因子、骨代謝、細(xì)胞凋亡、激素內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、血栓與止血、自身抗體科研elisa檢測(cè)試劑盒。點(diǎn)擊了解更多人ELISA試劑盒！

產(chǎn)品名稱	人骨保素（OPG）試劑盒說(shuō)明書
英文名稱	Human OPG ELISA Kit
規(guī)格	48T/96T

人骨保素（OPG）試劑盒說(shuō)明書 Human OPG ELISA Kit【實(shí)驗(yàn)用途】骨保素(OPG)是一種分泌型糖蛋白，屬于TNF受體超家族成員，具有TNF受體超家族特征性的N端富含半胱氨酸區(qū)域，其分子結(jié)構(gòu)與TNFR-2及CD40尤其相似，但它不含跨膜疏水區(qū)，小鼠OPG與人、大鼠的同源性分別為85%和95%，提示OPG基因在進(jìn)化中的高度保守。OPG分子由401個(gè)氨基酸組成，N端21個(gè)氨基酸為信號(hào)肽，經(jīng)糖基化后，成熟的OPG分子包含380個(gè)氨基酸，在胞內(nèi)先形成55 ku的單體，隨后兩條肽鏈間的Cys400形成二硫鍵，以110 ku的同源二聚體形式分泌至胞外，每條OPG多肽鏈包含23個(gè)半胱氨酸，可形成9對(duì)二硫鍵，整個(gè)蛋白質(zhì)分為7個(gè)結(jié)構(gòu)域，并形成3個(gè)功能區(qū)：TNF受體結(jié)構(gòu)區(qū)，包括結(jié)構(gòu)域1～4，尤其是Cys185之前部分，是OPG主要的功能區(qū)域，執(zhí)行抑制破骨細(xì)胞的功能；死亡域同源區(qū)5和6，與Fas蛋白跨膜區(qū)形成融合蛋白后具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性，可以引起細(xì)胞凋亡；肝素結(jié)合結(jié)構(gòu)區(qū)，其作用尚不明確。所提供的試劑是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)生物素（biotin）標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
注意事項(xiàng)：
1．人骨保素（OPG）試劑盒說(shuō)明書試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間
控制在 5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本 OD值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)
算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10.如與英文說(shuō)明書有異，以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna