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更新时间：2019-03-09 20:23:45浏览次数：156次

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大鼠丙二醛（MDA）试剂盒说明书【实验用途】E-Selectin, E选择素，选择素家族一员，是一种分子量107-115KDa的细胞表面糖蛋白。E选择素配体在中性粒细胞、单核细胞、部分记忆T细胞上表达。E选择素/E选择素配体在炎症时使中性粒细胞吸附至血管壁，并沿血管壁移动。此初始反应引起ICAM-1，VCAM-1更强烈的反应，Z终使炎症细胞进入血管外间质。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒（ELISA）。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体，经生物素（biotin）标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
试剂配制：
1、大鼠丙二醛（MDA）试剂盒说明书酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
大鼠丙二醛（MDA）试剂盒说明书Rat E-Selectin/E-Sel ELISA Kit

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选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
一.灵敏度：有二层含义：
1）为试剂检出被检物质的Z低量的能力；
2）为试剂对大量样品中阳性检出的能力。
1.精密度：ELISA试剂一般指其批内CV%，其值应小于15%；定量试剂应同时考察线性范围。
2.准确度：通过添加回收实验进行评价。
3.简便性：指在不影响试剂的前三项指标的前题下，实验和测定步骤越少越好，在定性实验中结果判断简单明了，定量试验结果计算也应简单。
4.安全性：指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
5.经济性：试剂在同等质量条件下通过大规模或技术进步降低成本，而市场价格比较合理。
6.试剂评价：需要有的确证方法和确证的样品进行检测。
结果判断与分析：
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的待测物质标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
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