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操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 人血清一氧化氮(NO)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human serum nitric oxide (NO) ELISA Kit |
貨號 | YS-H12525 |
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試劑配制
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
磷酸化白介素2受體β鏈抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-IL2 Receptor beta (Tyr364)
異檸檬酸脫氫酶gamma亞基抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:IDH3G
離子通道蛋白Kv4.3抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Kv4.3
鉀離子通道蛋白家族KCNQ2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:KCNQ2
有絲分裂驅動蛋白樣2B抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:KIF2B
腫瘤抑制基因LATS1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:LATS1
白細胞相關免疫球蛋白樣受體1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:LAIR-1
LAMTOR1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:LAMTOR1
親脂性蛋白B抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Lipophilin B
絲裂原活化蛋白激酶6抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:MAPK6
細胞周期G1的相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:MNAT1
肌球蛋白輕鏈9抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:MYL9
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-MKK7 (Ser271 + Thr275)
T淋巴細胞成熟相關蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:MPV17
人血清一氧化氮(NO)ELISA檢測試劑盒毛蕊異黃 20575-57-9 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
人參二醇 19666-76-3 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
羥基積雪草苷 34540-22-2 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
(R型)人參皂苷Rh2 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
五味子甲素 61281-38-7 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
芫花素 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;
兒茶素沒食子酸酯 130405-40-2 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
牡荊素葡萄糖苷 76135-82-5 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
紫草苷 63492-69-3 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
表兒茶素 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/支
異槲皮苷; 異櫟素;羅布甲素 21637-25-2 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
朝藿定B;羊霍定B 110623-73-9 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
菝葜皂苷元;知母皂苷元 126-19-2; 82597-74-8 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
蓮心堿高酸鹽 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
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