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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA檢測(cè)試劑盒>>人ELISA檢測(cè)試劑盒>> 人谷氨酸脫羧酶(GAD)ELISA檢測(cè)試劑盒
人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA檢測(cè)試劑盒
人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA檢測(cè)試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 人谷氨酸脫羧酶(GAD)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Human glutamic acid decarboxylase (GAD) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-H11305 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-P53(Ser392)
蛋白酶體PSMα6抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Proteasome 20S alpha 6
小鼠增殖細(xì)胞核抗原單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:PCNA(1C11)
腫瘤抑制基因PHLPP抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:PHLP
突觸后密度蛋白93抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:PSD93
相關(guān)血漿蛋白A抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:PAPPA
受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶3抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:RIPK3
Rad51抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Rad51
RMND5B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RMND5B
絲氨酸蘇氨酸激酶1受體相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:RIPK-1
環(huán)指蛋白189抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RING finger protein 189
RAS抑制蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:RIN1
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-c-Raf(Ser296)
S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:S100A7
人谷氨酸脫羧酶(GAD)ELISA檢測(cè)試劑盒1000mL PBS-Tween-20 Solution,20X PBS-Tween-20 Solution,20X 常溫保存
100mL PEG 3350 Solution,50% PEG 3350 Solution,50% 常溫保存
250mL PEG-LiOAc Solution PEG-LiOAc Solution 常溫保存
100mL PEG-TE-LiAc Solution PEG-TE-LiAc Solution 常溫保存
100mL Phosphatase Buffer-1,2X Phosphatase Buffer-1,2X 常溫保存
5mL Phosphatase Inhibitors Cocktail-I Phosphatase Inhibitors Cocktail-I 常溫保存
5mL Phosphatase Inhibitors Cocktail-II Phosphatase Inhibitors Cocktail-II 常溫保存
500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH4.4 Phosphate Buffer,0.2M, pH4.4 常溫保存
500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH6.8 Phosphate Buffer,0.2M, pH6.8 常溫保存
500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH7.0 Phosphate Buffer,0.2M, pH7.0 常溫保存
500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH7.2 Phosphate Buffer,0.2M, pH7.2 常溫保存
500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH7.4 Phosphate Buffer,0.2M, pH7.4 常溫保存
500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH7.4 Phosphate Buffer,0.2M, pH7.4 常溫保存
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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