試劑配制
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

服務(wù)：
      我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測(cè)試劑盒，有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。

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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1059)

WD重復(fù)蛋白16抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：WDR16

鋅指蛋白Zdhhc18抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：ZDHHC-18

鋅指蛋白437抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：ZBTB2

硫氧還蛋白還原酶抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：2 Cys Peroxiredoxin

磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：Phospho-SHP2 (Tyr584)

鉀依賴鈉鈣交換蛋白6抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：SLC6A19

磷酸化核突觸蛋白α抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：phospho-Alpha synuclein(Ser129)

造血細(xì)胞磷酸酶抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：SHP-1

沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：SIRT4

Shh信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：Shh

超氧化物歧化酶3抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：SOD3

羊抗牛IgG抗血清 1mlGoat anti-Bovine IgG whole serum

FITC標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 0.1mlDog IgM/FITC

人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)ELISA檢測(cè)試劑盒250mL Phosphate Buffer，0.5M, pH9.0  Phosphate Buffer，0.5M, pH9.0  常溫保存

250mL Phosphate Buffer，0.5M, pH9.5  Phosphate Buffer，0.5M, pH9.5  常溫保存

250mL Phosphate Buffered RIPA  Phosphate Buffered RIPA  常溫保存

125mL Phosphate Buffered RIPA，2X Phosphate Buffered RIPA，2X 常溫保存

250mL Phosphate Buffered Saline (PBS）,10X, pH7.4  Phosphate Buffered Saline (PBS）,10X, pH7.4  常溫保存

250mL Phosphate Buffered Saline (PBS),1X  Phosphate Buffered Saline (PBS),1X  常溫保存

500mL Phosphate Buffered Saline Dulbecco’s，10X  Phosphate Buffered Saline Dulbecco’s，10X  常溫保存

4000mL Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing) Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing) 常溫保存

500mL Phosphate Buffered Saline，10X，without potassium  Phosphate Buffered Saline，10X，without potassium  常溫保存

250mL Phosphate Citrate Buffer，2X  Phosphate Citrate Buffer，2X  常溫保存

500mL Phospho-Protein Extraction Buffer  Phospho-Protein Extraction Buffer  常溫保存

500mL Phospho-Protein Extraction Buffer I  Phospho-Protein Extraction Buffer I  常溫保存

500mL Phospho-Protein Extraction Buffer II  Phospho-Protein Extraction Buffer II  常溫保存

操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。