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人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA檢測試劑盒
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。
產(chǎn)品名稱 | 人骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human osteoprotegerin ligand (OPGL) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-H11312 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
TRIM32抗原 0.5mgTRIM32(tripartite motif protein 32)
細(xì)胞表面趨化因子受體1抗原 0.5mgCXCR1 (CXC-chemokine receptor 1)
髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b(抗原) 0.5mgMAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;)
淋巴細(xì)胞生成素-1(抗原) 0.5mgTSLP(Thymic stromal lymphopoietin isoform 1)
細(xì)胞角蛋白19抗原 0.5mgCytokeratin 19
三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物 1mgMelamine/BSA
熒光素標(biāo)記牛IgG 0.3mlBovine IgG/FITC
熒光素Cy7標(biāo)記大鼠IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照) 0.1mlRat IgG/Cy7
熒光素Cy3標(biāo)記羊IgM 0.1mlGoat IgM/Cy3
辣根過氧化物酶標(biāo)記牛血清白蛋白 0.1mlBSA/HRP
小鼠γ干擾素 96TIFN- Gamma ELISA Kit(mouse)
甲胎蛋白定量(一/二步夾心法) 96TAFP
兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白 96THpt/HP (Rabbit Haptoglobin) ELISA Kit
大鼠軸突生長誘向因子1 96T(Ntn1)ELISA Kit
人骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA檢測試劑盒50mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),1M Potassium Acetate Solution,1M 常溫保存
50mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),1M,pH7.5 Potassium Acetate Solution,1M,pH7.5 常溫保存
250mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),20% Potassium Acetate Solution,20% 常溫保存
100mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),8M Potassium Acetate Solution,8M 常溫保存
50mL Potassium Chloride Solution(溶液),1M Potassium Chloride Solution,1M 常溫保存
50mL Potassium Chloride Solution(溶液),3M Potassium Chloride Solution,3M 常溫保存
50mL Potassium Chloride Solution(溶液),5M Potassium Chloride Solution,5M 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.0 Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.0 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.2 Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.2 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.4. Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.4. 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.5 Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.5 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.6 Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.6 常溫保存
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH8.0 Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH8.0 常溫保存
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