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人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)ELISA檢測試劑盒
服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human bone morphogenetic protein 7 (BMP-7) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11315 |
試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
人骨膠原交聯(lián) 96TCr(Human Crosslaps) ELISA Kit
人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 96TMAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit
人亮氨酰氨基肽酶 96TLAP(Human Leucine aminopepridase) ELISA Kit
人己糖激酶 96THK(Human Hexokinase) ELISA Kit
人腎上皮質(zhì)抗體 96TACA(Human adrenal cortex antibody) ELISA Kit
人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G 96TSerpina3g(Human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G) ELISA Kit
人喋呤 96TMTX(Human methotrexate) ELISA Kit
人胎兒血紅蛋白 96THBF(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit
人一氧化碳血紅蛋白 96THbCO(Human carboxyhemoglobin) ELISA Kit
人凝血因子Ⅹ 96THuman coagulation factor X ,F X ELISA Kit
人疊氮胸苷 96Thuman Azidothymidine,AZT ELISA Kit
人套膜蛋白 96THuman Involucrin,iNV ELISA Kit
封閉用正常山羊血清(原液) 5mlGoat serum
細菌RNA提取試劑 10ml
人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA檢測試劑盒125mL RIPA Buffer—2,2X RIPA Buffer—2,2X 常溫保存
250mL RIPA without SDS with EDTA RIPA without SDS with EDTA 常溫保存
2mL RNA Loading Buffer,6X RNA Loading Buffer,6X 常溫保存
1mL RNA Sample Buffer (with EB) RNA Sample Buffer (with EB) 常溫保存
1mL RNA Sample Buffer (without EB) RNA Sample Buffer (without EB) 常溫保存
250mL RNase-Free Phosphate Buffered Saline (無RNase的PBS), 10X RNase-Free Phosphate Buffered Saline, 10X 常溫保存
100mL RNase-Free Potassium Acetate Solution(無RNase的乙酸鉀溶液),1M,pH7.5 RNase-Free Potassium Acetate Solution,1M,pH7.5 常溫保存
100mL RNase-Free Potassium Acetate Solution(無RNase的乙酸鉀溶液),8M RNase-Free Potassium Acetate Solution,8M 常溫保存
100mL RNase-Free Potassium Chloride Solution(無RNase的溶液),1M RNase-Free Potassium Chloride Solution,1M 常溫保存
100mL RNase-Free Potassium Chloride Solution(無RNase的溶液),5M RNase-Free Potassium Chloride Solution,5M 常溫保存
100mL RNase-Free Sodium Acetate Solution(無RNase的乙酸鈉溶液),1M,pH4.5 RNase-Free Sodium Acetate Solution,1M,pH4.5 常溫保存
100mL RNase-Free Sodium Acetate Solution(無RNase的乙酸鈉溶液),3M,pH5.2 RNase-Free Sodium Acetate Solution,3M,pH5.2 常溫保存
100mL RNase-Free Sodium Acetate Solution(無RNase的乙酸鈉溶液),3M,pH7.0 RNase-Free Sodium Acetate Solution,3M,pH7.0 常溫保存
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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