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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human oxidized low density lipoprotein (OxLDL) ELISA Kit |
貨號 | YS-H12582 |
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
蛋白酶激活受體4抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:PAR4
磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-PKC delta (Tyr52)
磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-RPS6KB1(Ser417)
急性髓細胞白血病1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:RUNX1
環(huán)指蛋白35抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RNF35
再生基因蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:REG4
磷酸化G蛋白信號轉導調節(jié)因子19抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-RGS19(Tyr143)
Ras樣蛋白家族10A抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RASL10A
可溶性E選擇素 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:se-selectin
分選連接蛋白10抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:SNX10
磷酸化Src原癌基因抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-Src(Tyr215)
鋅指轉錄蛋白Sall1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:SALL1
墨蝶蛉還原酶抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:SPR
速激肽受體3抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:TACR3
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA檢測試劑盒竹紅菌丙素 137592-26-8 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg訂購|咨
草夾竹桃苷 531-28-2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
栗精胺 79831-76-8 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
七葉皂苷 6805-41-0 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
紫莖女貞苷C 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
月桂氮卓 59227-89-3 規(guī)格: HPLC≥98%;0.1ml
9-硝基喜樹堿 86639-62-5 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
酸棗仁皂苷B1 68144-21-8 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
豆寇酸單甘油酯 589-68-4 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
去甲氧基醉椒素 15345-89-8 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
馬鞭草苷 548-37-8 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
京平龍膽雙糖苷 29307-60-6 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
胡薄荷 89-80-5 規(guī)格: HPLC≥98%;0.2ml
N,N’-二甲基蝙蝠葛堿化物 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
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