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實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內(nèi)用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
公司向您推薦大鼠卵巢顆粒細胞價格的詳細說明:
產(chǎn)品名稱 | 大鼠卵巢顆粒細胞價格 |
規(guī)格 | 5×105 |
貨號 | YS-X6586 |
產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度??萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、科技售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長特性,在適當?shù)臅r候進行傳代,一般3~4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代:
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞,一般按1:2-1:5 稀釋細胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。?
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
無菌鹽水三氟烷磺酸鏑 98%7%NaCl胰胨水pUNO1-hIRAK4a
PW1,4-二溴萘 98%10%NaCl胰胨水pUNO1-hIRAKMa
葡萄糖瓊脂2,6-二溴萘 99%3%NaCl阿拉伯糖pUNO1-hIRF1
氧化酶試紙2,7-二溴萘 98%3%NaCl乳糖pUNO1-hIRF3
氧化酶試劑D-烯基甘氨酸鹽酸鹽 95%3%NaCl甘露醇pUNO1-hIRF4b
培養(yǎng)基三氟酮酸酯 98%3%NaCl蔗糖pUNO1-hIRF5a
革蘭氏染色液三氟磺酸鉺 98%3%NaCl氨基酸脫羧酶對照pUNO1-hIRF6
庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)三氟磺酸銪 98%3%NaClpUNO1-hIRF7a
庖肉牛肉粒FMOC-L-炔基甘氨酸 98%3%NaCl精氨酸雙水解酶pUNO1-hIRF8
庖肉培養(yǎng)基FMOC-D-炔基甘氨酸 96%3%NaCl賴氨酸脫羧酶pUNO1-hIRF9
大鼠卵巢顆粒細胞價格氧鋯 水合物 AR,99.5%超濾離心管 96個/盒3-溴基-2-環(huán)基-4-(4'-氟)喹啉Rat Pgk1(PhosphoglyceRate kinase 1) ELISA Kit
Rat Aadat(Kynurenine/alpha-aminoadipate aminotransferase, mitochondrial) ELISA Kit
溴硝醇 分析標準品超濾離心管 96個/盒大豆異黃酮Rat Aopep(Aminopeptidase O) ELISA Kit
Rat Gad1(Glutamate decarboxylase 1) ELISA Kit
溴硝醇 98%超濾離心管 96個/盒伊馬替尼Rat Atp5b(ATP synthase subunit beta, mitochondrial) ELISA Kit
Rat Pvalb(Parvalbumin alpha) ELISA Kit
2-基苯胺 98%超濾離心管 96個/盒塞來昔布Rat ACO2(Aconitate hydRatase, mitochondrial) ELISA Kit
Rat Pmp22(Peripheral myelin protein 22) ELISA Kit
正基鋰正己烷溶液 1.6M 己烷溶液(15%溶液)超濾離心管 96個/盒4-(3-基)氨基-3-吡啶磺酰胺Rat Gc(Glucagon) ELISA Kit
Rat St2a1(Bile salt sulfotransferase) ELISA Kit
正基鋰 2.7M 己烷溶液(25%溶液)超濾離心管 96個/盒京尼平Rat Slc27a1(Long-chain fatty acid transport protein 1) ELISA Kit
Rat Sncg(Gamma-synuclein) ELISA Kit
正基鋰正己烷溶液 2.2M 己烷溶液(20%溶液)超濾離心管 96個/盒富硒酵母粉Rat Pgr(Progesterone receptor) ELISA Kit
Rat Lipe(Hormone-sensitive lipase) ELISA Kit
溴素 ACS超濾離心管 96個/盒卡波姆941Rat Acaca(Acetyl-CoA carboxylase 1) ELISA Kit
Rat Tcn2(Transcobalamin-2) ELISA Kit
正基鋰 2.5M 己烷溶液超濾離心管 96個/盒新戊二醇Rat Jun(Transcription factor AP-1) ELISA Kit
Rat Adra1a(Alpha-1A adrenergic receptor) ELISA Kit
硫酸銫 AR,99.5%超濾離心管 96個/盒哈茨木霉菌Rat Drd1(D(1A)dopamine receptor) ELISA Kit
Rat STK11(Serine/threonine-protein kinase STK11) ELISA Kit
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
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