實驗操作步驟： 
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

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產(chǎn)品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術(shù)部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。科技提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、科技售后服務(wù)標準。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長特性，在適當?shù)臅r候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

酰胺肉湯氧化鋅 99.999% metals basis煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB）ChemiComp GT115

氧化酶試紙氧化鋅 SPVoges-Proskauer(V-P)試劑ChemiComp GT116

鈉氏試劑氧化鋅 99.99% metals basis改良CCD瓊脂基礎(chǔ)(mCCD)ChemiComp GT115

培養(yǎng)基氧化鋅 分析標準品，絡(luò)合量：12.280mmol/gBolton肉湯ChemiComp GT116

庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)氧化鋅 藥典級（Ph. Eur., BP, USP, 99-100.5%）Mueller-Hinton瓊脂（MHA）Fast-Media® Amp LB

庖肉牛肉粒四基氟化銨，三水 90%腦心浸液肉湯Fast-Media® Amp Agar

庖肉培養(yǎng)基四基酸銨 97%10％胰酪胨大豆肉湯Fast-Media® Base LB

卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)酸鈉，三水 AR,99%MC培養(yǎng)基Fast-Media® Kan LB

50%卵黃鹽水懸液酸鈉，三水 CP,98%VRB-MUG瓊脂Fast-Media® Kan Agar

革蘭氏染色液酸鈉，三水 GR,99.5%緩沖蛋白胨水（BPW）Fast-Media® Base Agar

小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞價格硫酸根離子標準溶液500mg/L，溶劑：水Matrigel Matrix Hesc-qualified（基底膠）鹽酸昂丹司瓊Mouse FX(Coagulation factor X) ELISA Kit

Mouse FXII(Coagulation Factor XII) ELISA Kit

硫酸根離子標準溶液5000mg/L，溶劑：水培養(yǎng)板  48孔 Costar 48孔板，TC表面，滅菌，單個包裝，1個/包，100包/箱鈀碳催化劑Mouse G6PC(Glucose-6-Phosphatase, Catalytic) ELISA Kit

Mouse G6PD(Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase) ELISA Kit

硫酸根離子標準溶液100μg/ml,基體:硫酸鈉溶液Matrigel（基底膠）GFR,低生長因子奈非西坦Mouse GAD-Ab-IgM(Glutamic Acid Decarboxylase Autoantibody IgM) ELISA Kit

Mouse GAL1(Galectin 1) ELISA Kit

硫酸根離子標準溶液1000μg/ml,溶劑:水Matrigel（基底膠）GFR,無酚紅托伐普坦Mouse GAL12(Galectin 12) ELISA Kit

Mouse GAL2(Galectin 2) ELISA Kit

硫酸根離子標準溶液100μg/ml,溶劑:水Matrigel（基底膠）4-氯去睪醇Mouse GAL3(Galectin 3) ELISA Kit

Mouse GAL4(Galectin 4) ELISA Kit

釤標準溶液 1000μg/mlMatrigel（基底膠）無酚紅噻奈普汀半硫酸鹽一水合物Mouse GAL6(Galectin 6) ELISA Kit

Mouse GAL7(Galectin 7) ELISA Kit

硅酸根標準溶液 1000μg/ml酶標板(不可拆 獨立包裝) 96孔酶標板，平底，高結(jié)合，PS（聚苯烯）材質(zhì)，未滅菌，1個/包，100包/箱氧磺隆Mouse GAL8(Galectin 8) ELISA Kit

Mouse GAL9(Galectin 9) ELISA Kit

(K,Na)多元素混合標準溶液100μg/ml培養(yǎng)板  96孔板 平底 TC表面 PS（聚苯烯）材質(zhì) 帶蓋 滅菌  1個/包 100包/箱N,N-二基苯胺鹽酸鹽Mouse GATA3(GATA Binding Protein 3) ELISA Kit

Mouse GCP-2(Granulocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit

(As,Sb,Li,Mn,Mo,Ni,P,K,Sc,Na,S)多元素混合標準溶液 100μg/ml培養(yǎng)板（U底） 96孔板，透明，圓底，帶蓋，TC表面，滅菌，1個/包，50包/箱噻奈普汀半硫酸鹽一水合物Mouse GDF1(Growth Differentiation Factor 1) ELISA Kit

Mouse GDF10(Growth Differentiation Factor 10) ELISA Kit

（As,Sb,Bi,Pb,Sn,Na,Cd）多元素混合標準溶液 1000μg/ml黑色酶標板（不可拆） 96孔板，黑色，平底，高結(jié)合，無蓋，未滅菌，25個/包，4包/箱N-Boc-2哌啶醇Mouse GDF2(Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit

Mouse GDF3(Growth Differentiation Factor 3) ELISA Kit

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。