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人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子elisa試劑盒說明書
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human acid sphingomyelinase (ASM) ELISA Kit |
貨號 | YS-H12155 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
酸敏感鉀離子通道蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:KCNK3
磷酸化淋巴細胞特異性蛋白酪氨酸激酶抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-Lck (Tyr505)
神經(jīng)突觸粘附樣分子1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:LRFN1
皮屑樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:LEPREL2
乳鐵蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Lactoferrin
甲硝唑單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Metronidazole(1C2)
促黑細胞激素α抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:alpha MSH
同源結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:MIXL1
胃動素受體抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:MTLR
乳珠蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Mammaglobin B
原癌基因M-ras抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:MRas
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-MAP3K8 (Thr290)
減數(shù)分裂核分裂蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:MND1
胃粘液素抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Mucin 5AC
人酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)ELISA檢測試劑盒大鼠N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)ELISA試劑盒 英文名: NAGase ELISA Kit
大鼠N--D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體1(GRIN1)ELISA試劑盒 英文名: GRIN1 ELISA Kit
大鼠N-myc下游調(diào)節(jié)基因2(NDRG2)ELISA試劑盒 英文名: NDRG2 ELISA Kit
大鼠Mg2+/Mn2+依賴性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)ELISA試劑盒 英文名: PPM1A ELISA Kit
大鼠M2-型酸激酶(PKM2)ELISA試劑盒 英文名: PKM2 ELISA Kit
大鼠L1-細胞粘附分子(L1CAM)ELISA試劑盒 英文名: L1CAM ELISA Kit
大鼠Kruppel樣因子4(KLF4)ELISA試劑盒 英文名: KLF4 ELISA Kit
大鼠Kruppel樣因子2(KLF2)ELISA試劑盒 英文名: KLF2 ELISA Kit
大鼠Klotho蛋白(KL)ELISA試劑盒 英文名: KL ELISA Kit
大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒 英文名: Ki67P ELISA Kit
大鼠Janus激酶3(JAK3)ELISA試劑盒 英文名: JAK3 ELISA Kit
大鼠Janus激酶2(JAK2)ELISA試劑盒 英文名: JAK2 ELISA Kit
大鼠GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)ELISA試劑盒 英文名: GATA2 ELISA Kit
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