細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    正常前列腺上皮細胞：RWPE-1 

別稱RWPE1

年齡（性別）男；54歲

組織來源器官：前列腺； 疾病：正常； 細胞類型：上皮細胞

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的18(HPV-18)進行轉(zhuǎn)化，建立了RWPE-1細胞株[PubMed:9214605]。在三維Matrigel培養(yǎng)時，在雄激素作用下，RWPE-1細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA[PubMed:11170142]。當與Matrigel或基質(zhì)細胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE-1細胞也能形成腺胞[PubMed:11304724]并產(chǎn)生PSA。來源于RWPE-1細胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2細胞株[PubMed:9214605]和RWPE2-W99細胞株。另外，用N-甲醇-N-(MNU)處理RWPE-1細胞，建立了一系列模擬前列腺癌進程中不同時期的成瘤細胞株。它們是WPE1-NA22、WPE1-NB14、WPE1-NB11和WPE1-NB26細胞株。據(jù)提供者報道，RWPE-1細胞經(jīng)過檢測，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。

生物安全等級2

生長培養(yǎng)基K-SFM＋0.05mg/mL BPE＋5ng/mL EGF＋1% P/S

推薦傳代比例1:2-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~22 hours

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性No, in nude mice (with or without Matrigel). No, in soft agar.

受體表達情況androgen receptor, expressed (upregulated upon exposure to androgen)

抗原表達情況kallikrein 3, KLK3 (prostate specific antigen, PSA); Homo sapiens, expressed (upon exposure to androgen); (upon exposure to androgen)

基因表達情況cytokeratin 18, cytokeratin 8; Tumor Supressor Gene(s): p53+, pRB+

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

人 TNFRSF11B 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 TNFRSF11B 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

人 MMP-12 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 MMP-12 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

人 FCGR2B / CD32b 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 FCGR2B / CD32b 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

人 DcR3 / TNFRSF6B 轉(zhuǎn)錄變體M

正常前列腺上皮細胞：RWPE-1 BFAR/RNF47  環(huán)指蛋白47抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-Ack1(Tyr284)  磷酸化Ack1抗體 0.1ml

KF鏈球菌瓊脂 KF Streptococcus Agar 100

1 g Spermidine.trihvdrochloride（nNOS抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

2 ug pRNATin-H1.2/Retro pRNATin-H1.2/Retro 低溫運輸，-20℃保存

250mL MES Buffer,1.0M,pH5.5  MES Buffer,1.0M,pH5.5  常溫保存

25g N,N,- 二環(huán)已基碳化二亞胺 DCC(N,N,-Dicylohexylcarbodiimide)                      室溫保存

250mL HEPES Buffered Saline,2X,for transfection  HEPES Buffered Saline,2X,for transfection  常溫保存

50次 柱式葡萄球菌RNAout  

2 ug pDC312 pDC312 低溫運輸，-20℃保存

2 ug pEF6/myc-His C pEF6/myc-His C 低溫運輸，-20℃保存

布魯氏菌培養(yǎng)基抑菌劑  1ml*5

PMS/FOLH1/PMSA  前列特異膜抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml