組成及試劑配制:
1、圓弧青霉PCR檢測試劑盒廠家酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應(yīng)管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測在60℃，反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。

1抗體缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒
IMA ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族5抗體缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒
KYN ELISA Kit植物生長激素ABP1抗體犬尿氨酸(KYN)ELISA試劑盒
AR ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體醛糖還原酶(AR)ELISA試劑盒
ALD ELISA Kitalpha 1腎上腺素能受體B抗體醛縮酶(ALD)ELISA試劑盒
ALD ELISA KitBcl2 alpha蛋白抗體醛固酮(ALD)ELISA試劑盒
i-PTH ELISA Kit白細(xì)胞抗原抗體B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒
SIRT7/SIR2L7 ELISA KitBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體去乙?；窼irtuin-7(SIRT7/SIR2L7)ELISA試劑盒
SIRT6/SIR2L6 ELISA KitBCL7B蛋白抗體去乙?；窼irtuin-6(SIRT6/SIR2L6)ELISA試劑盒
SIRT5/SIR2L5 ELISA Kit堿性核蛋白2抗體去乙?；窼irtuin-5(SIRT5/SIR2L5)ELISA試劑盒
SIRT4/SIR2L4 ELISA KitB細(xì)胞白血病/淋巴瘤蛋白7抗體去乙?；窼irtuin-4(SIRT4/SIR2L4)ELISA試劑盒
SIRT2/SIR2L/SIR2L2 ELISA Kit先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體去乙酰化酶Sirtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)ELISA試劑盒
SIRT1/SIR2L1 ELISA KitB細(xì)胞遷移基因1抗體去乙?；窼irtuin-1(SIRT1/SIR2L1)ELISA試劑盒
dGHRL ELISA Kit脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白BEAN1抗體去乙酰化饑餓激素(dGHRL)ELISA試劑盒
ASGPR ELISA KitB7H6蛋白抗體去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)ELISA試劑盒
AGSPR ELISA KitB細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體去唾液酸糖蛋白受體(AGSPR)ELISA試劑盒
NE ELISA Kit橋連整合因子蛋白抗體去甲腎上腺素(NE)ELISA試劑盒
NA ELISA KitBADH2抗體去甲腎上腺素(NA)ELISA試劑盒
dDAVP ELISA Kit丁酰膽堿酯酶單克隆抗體去氨加壓素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加壓素(dDAVP)ELISA試劑盒
CCR3 ELISA Kit磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體趨化因子受體3(CCR3)ELISA試劑盒
CXCL17 ELISA Kitβ-乳球蛋白抗體趨化因子配體17(CXCL17)ELISA試劑盒
CXCL16 ELISA Kitβ-乳球蛋白抗體趨化因子CXCL16(CXCL16)ELISA試劑盒
CCL1 ELISA Kit緩激肽B2受體抗體趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)ELISA試劑盒
CCL26 ELISA Kit丁酰膽堿酯酶抗體趨化因子26(CCL26)ELISA試劑盒
CXCL2 ELISA Kit丁酰膽堿酯酶抗體趨化因子2(CXCL2)ELISA試劑盒
fractalkine/CX3CL1 ELISA KitBLAME抗體趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒
FK ELISA Kit巴曲霉毒素單克隆抗體趨化因子(FK)ELISA試劑盒
CCL5/RANTES ELISA Kit蛇毒巴曲酶抗體趨化因子(CCL5/RANTES)ELISA試劑盒
KIF27 ELISA Kit溴脫氧尿苷抗體驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員27(KIF27)ELISA試劑盒
SCARB1 ELISA Kit腫瘤/抗原抗體2.2抗體清道夫受體類B成員1(SCARB1)ELISA試劑盒
SRB/CD36 ELISA Kit腫瘤/抗原抗體2.3抗體清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒
L-ferritin ELISA Kit腫瘤/抗原抗體2.4抗體輕鏈鐵蛋白(L-ferritin)ELISA試劑盒
HFE2 ELISA Kit腦鈉素/利鈉肽抗體青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒
PPIA/CYPA ELISA KitB Raf抗體親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA試劑盒
ERCC1 ELISA Kit癌易感基因1抗體切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒
PSAP ELISA Kit癌易感基因2抗體鞘脂激活蛋白原(PSAP)ELISA試劑盒
SM ELISA Kit溴脫氧尿苷抗體鞘磷脂(SM)ELISA試劑盒
SPK1 ELISA KitB細(xì)胞遷移基因2抗體鞘氨醇激酶1(SPK1)ELISA試劑盒
SPH ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抗體鞘氨醇(SPH)ELISA試劑盒
Dsg-3 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白7抗體橋粒芯糖蛋白3(Dsg-3)ELISA試劑盒
DSG2 ELISA Kitβ-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體橋粒芯糖蛋白2(DSG2)ELISA試劑盒
Dsg-1 ELISA Kitβ-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體橋粒芯糖蛋白1(Dsg-1)ELISA試劑盒
DGS-E1 ELISA Kit癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒
DSC2 ELISA Kit血型抗原抗體前體蛋白抗體橋粒糖蛋白2(DSC2)ELISA試劑盒
HRGP ELISA Kit凱爾血型糖蛋白CD238抗體羥脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒
Hyp ELISA Kit嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2抗體羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒
HOLG ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白10抗體羥賴氨酸糖苷(HOLG)ELISA試劑盒
Hyl ELISA Kit溴脫氧尿苷單克隆抗體羥賴氨酸(Hyl)ELISA試劑盒
HMG-CoAR ELISA KitBEND2蛋白抗體羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)ELIS

1抗體缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒
IMA ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族5抗體缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒
KYN ELISA Kit植物生長激素ABP1抗體犬尿氨酸(KYN)ELISA試劑盒
AR ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體醛糖還原酶(AR)ELISA試劑盒
ALD ELISA Kitalpha 1腎上腺素能受體B抗體醛縮酶(ALD)ELISA試劑盒
ALD ELISA KitBcl2 alpha蛋白抗體醛固酮(ALD)ELISA試劑盒
i-PTH ELISA Kit白細(xì)胞抗原抗體B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒
SIRT7/SIR2L7 ELISA KitBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體去乙?；窼irtuin-7(SIRT7/SIR2L7)ELISA試劑盒
SIRT6/SIR2L6 ELISA KitBCL7B蛋白抗體去乙酰化酶Sirtuin-6(SIRT6/SIR2L6)ELISA試劑盒
SIRT5/SIR2L5 ELISA Kit堿性核蛋白2抗體去乙?；窼irtuin-5(SIRT5/SIR2L5)ELISA試劑盒
SIRT4/SIR2L4 ELISA KitB細(xì)胞白血病/淋巴瘤蛋白7抗體去乙酰化酶Sirtuin-4(SIRT4/SIR2L4)ELISA試劑盒
SIRT2/SIR2L/SIR2L2 ELISA Kit先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體去乙?；窼irtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)ELISA試劑盒
SIRT1/SIR2L1 ELISA KitB細(xì)胞遷移基因1抗體去乙?；窼irtuin-1(SIRT1/SIR2L1)ELISA試劑盒
dGHRL ELISA Kit脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白BEAN1抗體去乙?；囸I激素(dGHRL)ELISA試劑盒
ASGPR ELISA KitB7H6蛋白抗體去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)ELISA試劑盒
AGSPR ELISA KitB細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體去唾液酸糖蛋白受體(AGSPR)ELISA試劑盒
NE ELISA Kit橋連整合因子蛋白抗體去甲腎上腺素(NE)ELISA試劑盒
NA ELISA KitBADH2抗體去甲腎上腺素(NA)ELISA試劑盒
dDAVP ELISA Kit丁酰膽堿酯酶單克隆抗體去氨加壓素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加壓素(dDAVP)ELISA試劑盒
CCR3 ELISA Kit磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體趨化因子受體3(CCR3)ELISA試劑盒
CXCL17 ELISA Kitβ-乳球蛋白抗體趨化因子配體17(CXCL17)ELISA試劑盒
CXCL16 ELISA Kitβ-乳球蛋白抗體趨化因子CXCL16(CXCL16)ELISA試劑盒
CCL1 ELISA Kit緩激肽B2受體抗體趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)ELISA試劑盒
CCL26 ELISA Kit丁酰膽堿酯酶抗體趨化因子26(CCL26)ELISA試劑盒
CXCL2 ELISA Kit丁酰膽堿酯酶抗體趨化因子2(CXCL2)ELISA試劑盒
fractalkine/CX3CL1 ELISA KitBLAME抗體趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒
FK ELISA Kit巴曲霉毒素單克隆抗體趨化因子(FK)ELISA試劑盒
CCL5/RANTES ELISA Kit蛇毒巴曲酶抗體趨化因子(CCL5/RANTES)ELISA試劑盒
KIF27 ELISA Kit溴脫氧尿苷抗體驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員27(KIF27)ELISA試劑盒
SCARB1 ELISA Kit腫瘤/抗原抗體2.2抗體清道夫受體類B成員1(SCARB1)ELISA試劑盒
SRB/CD36 ELISA Kit腫瘤/抗原抗體2.3抗體清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒
L-ferritin ELISA Kit腫瘤/抗原抗體2.4抗體輕鏈鐵蛋白(L-ferritin)ELISA試劑盒
HFE2 ELISA Kit腦鈉素/利鈉肽抗體青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒
PPIA/CYPA ELISA KitB Raf抗體親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA試劑盒
ERCC1 ELISA Kit癌易感基因1抗體切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒
PSAP ELISA Kit癌易感基因2抗體鞘脂激活蛋白原(PSAP)ELISA試劑盒
SM ELISA Kit溴脫氧尿苷抗體鞘磷脂(SM)ELISA試劑盒
SPK1 ELISA KitB細(xì)胞遷移基因2抗體鞘氨醇激酶1(SPK1)ELISA試劑盒
SPH ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抗體鞘氨醇(SPH)ELISA試劑盒
Dsg-3 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白7抗體橋粒芯糖蛋白3(Dsg-3)ELISA試劑盒
DSG2 ELISA Kitβ-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體橋粒芯糖蛋白2(DSG2)ELISA試劑盒
Dsg-1 ELISA Kitβ-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體橋粒芯糖蛋白1(Dsg-1)ELISA試劑盒
DGS-E1 ELISA Kit癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒
DSC2 ELISA Kit血型抗原抗體前體蛋白抗體橋粒糖蛋白2(DSC2)ELISA試劑盒
HRGP ELISA Kit凱爾血型糖蛋白CD238抗體羥脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒
Hyp ELISA Kit嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2抗體羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒
HOLG ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白10抗體羥賴氨酸糖苷(HOLG)ELISA試劑盒
Hyl ELISA Kit溴脫氧尿苷單克隆抗體羥賴氨酸(Hyl)ELISA試劑盒
HMG-CoAR ELISA KitBEND2蛋白抗體羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)ELIS

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。