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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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12綿羊皰疹病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

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更新時(shí)間:2019-05-16 09:09:12瀏覽次數(shù):233次

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elisa檢測(cè)試劑盒
ATCC細(xì)胞
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
PCR試劑盒
培養(yǎng)基
感覺(jué)態(tài)細(xì)胞
PCR檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
質(zhì)粒
熒光定量PCR試劑盒
試劑盒
進(jìn)口elisa試劑盒
科研抗體
科研菌種
生化檢測(cè)試劑盒
科研細(xì)胞
產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
12綿羊皰疹病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū):如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

組成及試劑配制:
1、12綿羊皰疹病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。

產(chǎn)品名稱英文名稱價(jià)格
12綿羊皰疹病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)Abalone Spherical VirusPCR電詢


樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無(wú)菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無(wú)菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無(wú)菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測(cè),也可保存于-20℃待測(cè)。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見(jiàn)該試劑盒說(shuō)明書(shū)。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測(cè)混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽(yáng)性對(duì)照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測(cè)在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測(cè)選擇:選用FAM通道。

ATM ELISA Kit磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變因子(ATM)ELISA試劑盒
TCHH ELISA Kit磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3毛透明蛋白(TCHH)ELISA試劑盒
CECR1 ELISA Kit磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3貓眼綜合征染色體區(qū)候選基因1(CECR1)ELISA試劑盒
PPHLN1 ELISA Kit磷酸化c-fos抗體脈周蛋白1(PPHLN1)ELISA試劑盒
MGA ELISA Kit磷酸化c-fos抗體麥芽糖酶糖化酶(MGA)ELISA試劑盒
CLCA1 ELISA Kit磷酸化c-fos抗體氯離子通道輔助蛋白1(CLCA1)ELISA試劑盒
CLIC1 ELISA Kit缺氧誘導(dǎo)因子1α抑制蛋白抗體氯化物細(xì)胞內(nèi)通道蛋白1(CLIC1)ELISA試劑盒
RL ELISA Kit肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體絡(luò)絲蛋白(RL)ELISA試劑盒
OVCH2 ELISA Kit補(bǔ)體因子H抗體卵質(zhì)酶2(OVCH2)ELISA試劑盒
OVCH1 ELISA Kit促卵泡刺激素抗體卵質(zhì)酶1(OVCH1)ELISA試劑盒
FSTL1 ELISA Kit神經(jīng)元核抗原抗體抗體卵泡抑素樣蛋白1(FSTL1)ELISA試劑盒
FSHR ELISA KitFAM135B蛋白抗體卵泡刺激素受體(FSHR)ELISA試劑盒
LCAT ELISA Kit“衰老關(guān)鍵蛋白”抗體卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)ELISA試劑盒
FLCN ELISA Kit促卵泡刺激素受體抗體卵巢濾泡激素(FLCN)ELISA試劑盒
ASTL ELISA Kit成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子12抗體龍蝦肽酶樣金屬內(nèi)肽酶(ASTL)ELISA試劑盒
ST14 ELISA Kit成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子14抗體瘤變抑制因子14(ST14)ELISA試劑盒
TBP2 ELISA Kit腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2(TBP2)ELISA試劑盒
TrxR3 ELISA KitFAM96B蛋白抗體硫氧還蛋白還原酶3(TrxR3)ELISA試劑盒
TrxR2 ELISA Kit腦胚胎鋅指樣蛋白1抗體硫氧還蛋白還原酶2(TrxR2)ELISA試劑盒
TrxR1 ELISA KitFAM29蛋白抗體硫氧還蛋白還原酶1(TrxR1)ELISA試劑盒
SRXN1 ELISA KitMaFF相關(guān)蛋白抗體硫氧還蛋白1(SRXN1)ELISA試劑盒
SULF2 ELISA Kit凝血因子7抗體硫酸酯酶2(SULF2)ELISA試劑盒
SULF1 ELISA KitFEM1B抗體硫酸酯酶1(SULF1)ELISA試劑盒
DSE ELISA Kit纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子3抗體硫酸皮膚素差向異構(gòu)酶(DSE)ELISA試劑盒
HSPG2 ELISA Kit纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子4抗體硫酸肝素蛋白聚糖2(HSPG2)ELISA試劑盒
HSPG ELISA KitFRA-1蛋白抗體硫酸肝素蛋白聚糖(HSPG)ELISA試劑盒
HS ELISA Kit精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白抗體硫酸肝素(HS)ELISA試劑盒
TPMT ELISA Kit延伸突觸蛋白3抗體硫嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶(TPMT)ELISA試劑盒
TST ELISA Kit原纖維蛋白2抗體硫代硫酸鹽轉(zhuǎn)硫酶(TST)ELISA試劑盒
THTPA ELISA Kit尤文肉瘤FLI1蛋白抗體硫胺素三磷酸酶(THTPA)ELISA試劑盒
TPK1 ELISA Kit巖藻糖轉(zhuǎn)移酶1抗體硫胺焦磷酸激酶1(TPK1)ELISA試劑盒
SCCA2 ELISA Kit凋亡調(diào)節(jié)蛋白δ+γ抗體鱗狀細(xì)胞癌抗原2(SCCA2)ELISA試劑盒
SCCA1 ELISA Kit叉頭蛋白O1/O3/O4抗體鱗狀細(xì)胞癌抗原1(SCCA1)ELISA試劑盒
ICHYN ELISA Kit微管相關(guān)蛋白FAM82B抗體鱗蛋白(ICHYN)ELISA試劑盒
PLCγ1 ELISA Kit纖維蛋白原A鏈抗體磷酯酶Cγ1(PLCγ1)ELISA試劑盒
PEBP1 ELISA KitFAS凋亡抑制分子1抗體磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白1(PEBP1)ELISA試劑盒
PEMT ELISA KitFAS凋亡抑制分子2磷脂酰乙醇胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(PEMT)ELISA試劑盒
PISD ELISA Kit表皮細(xì)胞表面抗原抗體1抗體磷脂酰絲氨酸脫羧酶(PISD)ELISA試劑盒
PSR ELISA Kit凝血因子9抗體磷脂酰絲氨酸受體(PSR)ELISA試劑盒
PTDSS2 ELISA Kit凝血因子10抗體磷脂酰絲氨酸合酶2(PTDSS2)ELISA試劑盒
PTDSS1 ELISA Kit凝血因子11輕鏈抗體磷脂酰絲氨酸合酶1(PTDSS1)ELISA試劑盒
PLCγ2 ELISA Kit凝血因子12重鏈抗體磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cγ2(PLCγ2)ELISA試劑盒
PLCβ3 ELISA KitFIGNL1蛋白抗體磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cβ3(PLCβ3)ELISA試劑盒
PLCβ1 ELISA KitFAM70A蛋白抗體磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cβ1(PLCβ1)ELISA試劑盒
PICALM ELISA Kit含纖維蛋白原C結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體磷脂酰肌醇結(jié)合網(wǎng)格蛋白裝配蛋白(PICALM)ELISA試劑盒
GPC6 ELISA KitF-box蛋白相關(guān)蛋白6抗體磷脂酰肌醇蛋白聚糖6(GPC6)ELISA試劑盒
GPC5 ELISA Kit磷酸化成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體底物2抗體磷脂酰肌醇蛋白聚糖5(GPC5)ELISA試劑盒
GPC4 ELISA Kit椎骨蛋白2抗體磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)ELISA試劑盒
GPC3 ELISA Kit凝血因子VII磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)ELISA試劑盒
GPC2 ELISA Kit凝血因子10抗體磷脂酰肌醇蛋白聚糖2(GPC2)ELISA試劑盒
GPC1 ELISA Kit脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF2抗體磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)ELISA試劑盒
PGS1 ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白FGGY抗體磷脂酰甘油磷酸合酶1(PGS1)ELISA試劑盒
PA ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白FIG4抗體磷脂酸(PA)ELISA試劑盒
PLSCR5 ELISA Kit黃素腺嘌呤二核苷酸抗體磷脂爬行酶5(PLSCR5)ELISA試劑盒
PLSCR4 ELISA Kit甲酰肽受體3抗體磷脂爬行酶4(PLSCR4)ELISA試劑盒
PLSCR3 ELISA Kit兜甲蛋白抗體磷脂爬行酶3(PLSCR3)ELISA試劑盒
PLSCR2 ELISA Kit脂肪堆積和肥胖相關(guān)蛋白抗體磷脂爬行酶2(PLSCR2)ELISA試劑盒
PLD6 ELISA Kit鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子FARP2抗體磷脂酶D6(PLD6)ELISA試劑盒
PLD5 ELISA KitFK506結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白抗體磷脂酶D5(PLD5)ELISA試劑盒
PLD4 ELISA Kit成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1原癌基因伴侶蛋白抗體磷脂酶D4(PLD4)ELISA試劑盒
PLD3 ELISA Kit鈣粘蛋白家族成員7抗體磷脂酶D3(PLD3)ELISA試劑盒
PLD ELISA KitⅢ型纖維連接蛋白域蛋白2/5抗體磷脂酶D(PLD)ELISA試劑盒
PLB ELISA Kit細(xì)絲蛋白A抗體磷脂酶B(PLB)ELISA試劑盒
PLA2R1 ELISA Kit磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體磷脂酶A2受體1(PLA2R1)ELISA試劑盒
PLAA ELISA Kit磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)ELISA試劑盒
PLA1 ELISA KitDNA損傷修復(fù)基因XRCC9抗體磷脂酶A1(PLA1)ELISA試劑盒
PHPT1 ELISA Kit磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體磷酸組氨酸性磷酸酶1(PHPT1)ELISA試劑盒
Php ELISA Kit磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體磷酸組氨酸(Php)ELISA試劑盒
PCK1 ELISA Kit磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)ELISA試劑盒
PSAT1 ELISA Kit磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體磷酸絲氨酸轉(zhuǎn)氨酶1(PSAT1)ELISA試劑盒
PSPH ELISA Kit叉頭蛋白N1抗體磷酸絲氨酸性磷酸酶(PSPH)ELISA試劑盒
PLM ELISA Kit磷酸化DNA損傷修復(fù)基因XRCC9抗體磷酸神經(jīng)膜蛋白(PLM)ELISA試劑盒
PGD ELISA KitⅢ型纖維連接蛋白域蛋白1抗體磷酸葡萄糖脫氫酶(PGD)ELISA試劑盒
PTEN ELISA KitⅢ型纖維連接蛋白域蛋白8抗體磷酸酶張力蛋白同源物(PTEN)ELISA試劑盒
PMVK ELISA KitⅢ型纖維連接蛋白域蛋白3B抗體磷酸甲羥戊酸激酶(PMVK)ELISA試劑盒
PIK3Cδ ELISA Kit粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體磷酸肌醇-3-激酶催化亞基δ肽(PIK3Cδ)ELISA試劑盒
PIK3Cβ ELISA Kit細(xì)胞生長(zhǎng)抑制蛋白26/前列腺特異性膜抗原抗體樣蛋白抗體磷酸肌醇-3-激酶催化亞基β肽(PIK3Cβ)ELISA試劑盒
PI3K2α ELISA Kit腎母細(xì)胞瘤基因X染色體蛋白抗體磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)ELISA試劑盒
PFAS ELISA Kit磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體磷酸核糖甲酰甘氨酸脒合酶(PFAS)ELISA試劑盒
GART ELISA Kit腎母細(xì)胞瘤X蛋白抗體磷酸核糖甘氨酰胺轉(zhuǎn)甲酰基酶(GART)ELISA試劑盒
PAICS ELISA Kitα-L巖藻糖苷酶抗體磷酸核糖胺咪唑羧化酶(PAICS)ELISA試劑盒
PGK2 ELISA KitFbxW2蛋白抗體磷酸甘油酸酯激酶2(PGK2)ELISA試劑盒
PGK1 ELISA KitFbxw7蛋白抗體磷酸甘油酸酯激酶1(PGK1)ELISA試劑盒
PHGDH ELISA KitFBXW8蛋白抗體磷酸甘油酸脫氫酶(PHGDH)ELISA試劑盒
PGAM5 ELISA Kit人纖維蛋白原單克隆抗體磷酸甘油酸變位酶5(PGAM5)ELISA試劑盒
PGAM4 ELISA KitFANCD2抗體磷酸甘油酸變位酶4(PGAM4)ELISA試劑盒
PGAM1 ELISA Kit磷酸化FANCD2抗體磷酸甘油酸變位酶1(PGAM1)ELISA試劑盒
PMM2 ELISA Kit細(xì)胞外基質(zhì)蛋白FREM2抗體磷酸甘露糖酶1(PMM2)ELISA試劑盒
PMM1 ELISA Kit面肩肱型肌營(yíng)養(yǎng)不良癥相關(guān)蛋白FRG1抗體磷酸甘露糖酶1(PMM1)ELISA試劑盒
PPCDC ELISA KitCD350抗體磷酸泛酰半胱氨酸脫羧酶(PPCDC)ELISA試劑盒
PPCS ELISA KitCD344抗體磷酸泛酰半胱氨酸合成酶(PPCS)ELISA試劑盒
PDE9A ELISA Kit卷曲蛋白6抗體磷酸二酯酶9A(PDE9A)ELISA試劑盒
PDE8B ELISA Kit卷曲蛋白8抗體磷酸二酯酶8B(PDE8B)ELISA試劑盒
PDE8A ELISA KitFSD1蛋白抗體磷酸二酯酶8A(PDE8A)ELISA試劑盒
PDE7B ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體磷酸二酯酶7B(PDE7B)ELISA試劑盒
PDE7A ELISA KitPrader-Willi綜合征相關(guān)蛋白抗體磷酸二酯酶7A(PDE7A)ELISA試劑盒
PDE4D ELISA KitAKT相互作用蛋白蛋白抗體磷酸二酯酶4D(PDE4D)ELISA試劑盒
PDE12 ELISA KitDNA解旋酶V抗體磷酸二酯酶12(PDE12)ELISA試劑盒
PDE11A ELISA Kit遠(yuǎn)端上游元件結(jié)合蛋白3抗體磷酸二酯酶11A(PDE11A)ELISA試劑盒
PDE10A ELISA Kit巖藻糖變旋酶抗體磷酸二酯酶10A(PDE10A)ELISA試劑盒
Lptn ELISA KitX三體綜合征相關(guān)蛋白FUNDC1抗體淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn)ELISA試劑盒
LY96 ELISA Kit弗林蛋白酶抗體淋巴細(xì)胞抗原96(LY96)ELISA試劑盒
LY9 ELISA Kit富含絲氨酸/精氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)蛋白抗體淋巴細(xì)胞抗原9(LY9)ELISA試劑盒
LY86 ELISA Kit巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶6抗體淋巴細(xì)胞抗原86(LY86)ELISA試劑盒
LY75 ELISA Kit巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶7抗體淋巴細(xì)胞抗原75(LY75)ELISA試劑盒
LFA3 ELISA Kit眼睛和頭發(fā)顏色相關(guān)蛋白FUZ抗體淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原3(LFA3)ELISA試劑盒
LFA2 ELISA Kit濾泡型轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗體淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原2(LFA2)ELISA試劑盒
LFA1α ELISA Kit磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原1α(LFA1α)ELISA試劑盒
LCP2 ELISA KitFAM65B蛋白抗體淋巴細(xì)胞胞漿蛋白2(LCP2)ELISA試劑盒
LCP1 ELISA Kit胞外分泌型絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶FAM20C抗體淋巴細(xì)胞胞漿蛋白1(LCP1)ELISA試劑盒
LTβR ELISA Kit凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體抗體淋巴毒素β受體(LTβR)ELISA試劑盒
LTβ ELISA Kit纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體底物3抗體淋巴毒素β(LTβ)ELISA試劑盒
LNPEP ELISA Kit纖維連接蛋白抗體亮氨酰/半胱氨酰氨肽酶(LNPEP)ELISA試劑盒
LRRK2 ELISA KitFCHO1蛋白抗體亮氨酸豐富重復(fù)激酶2(LRRK2)ELISA試劑盒
LGI3 ELISA Kit磷酸化脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白亮氨酸豐富重復(fù)LGI家族成員3(LGI3)ELISA試劑盒
LRRFIP1 ELISA Kit脂肪酸結(jié)合蛋白12抗體亮氨酸豐富重復(fù)FLII相互作用蛋白1(LRRFIP1)ELISA試劑盒
LRG1 ELISA Kit四連接同源蛋白FJX1抗體亮氨酸豐富α2-糖蛋白1(LRG1)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

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