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產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
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組成及試劑配制:
1、同病毒綿羊膿皰病毒PCR檢測試劑盒廠家酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
同病毒綿羊膿皰病毒PCR檢測試劑盒廠家 | Ovine Ecthyma Virus(Orf)PCR | 電詢 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
PISD ELISA Kit表皮細(xì)胞表面抗原抗體1抗體磷脂酰絲氨酸脫羧酶(PISD)ELISA試劑盒
PSR ELISA Kit凝血因子9抗體磷脂酰絲氨酸受體(PSR)ELISA試劑盒
PTDSS2 ELISA Kit凝血因子10抗體磷脂酰絲氨酸合酶2(PTDSS2)ELISA試劑盒
PTDSS1 ELISA Kit凝血因子11輕鏈抗體磷脂酰絲氨酸合酶1(PTDSS1)ELISA試劑盒
PLCγ2 ELISA Kit凝血因子12重鏈抗體磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cγ2(PLCγ2)ELISA試劑盒
PLCβ3 ELISA KitFIGNL1蛋白抗體磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cβ3(PLCβ3)ELISA試劑盒
PLCβ1 ELISA KitFAM70A蛋白抗體磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cβ1(PLCβ1)ELISA試劑盒
PICALM ELISA Kit含纖維蛋白原C結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體磷脂酰肌醇結(jié)合網(wǎng)格蛋白裝配蛋白(PICALM)ELISA試劑盒
GPC6 ELISA KitF-box蛋白相關(guān)蛋白6抗體磷脂酰肌醇蛋白聚糖6(GPC6)ELISA試劑盒
GPC5 ELISA Kit磷酸化成纖維細(xì)胞生長因子受體底物2抗體磷脂酰肌醇蛋白聚糖5(GPC5)ELISA試劑盒
GPC4 ELISA Kit椎骨蛋白2抗體磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)ELISA試劑盒
GPC3 ELISA Kit凝血因子VII磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)ELISA試劑盒
GPC2 ELISA Kit凝血因子10抗體磷脂酰肌醇蛋白聚糖2(GPC2)ELISA試劑盒
GPC1 ELISA Kit脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF2抗體磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)ELISA試劑盒
PGS1 ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白FGGY抗體磷脂酰甘油磷酸合酶1(PGS1)ELISA試劑盒
PA ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白FIG4抗體磷脂酸(PA)ELISA試劑盒
PLSCR5 ELISA Kit黃素腺嘌呤二核苷酸抗體磷脂爬行酶5(PLSCR5)ELISA試劑盒
PLSCR4 ELISA Kit甲酰肽受體3抗體磷脂爬行酶4(PLSCR4)ELISA試劑盒
PLSCR3 ELISA Kit兜甲蛋白抗體磷脂爬行酶3(PLSCR3)ELISA試劑盒
PLSCR2 ELISA Kit脂肪堆積和肥胖相關(guān)蛋白抗體磷脂爬行酶2(PLSCR2)ELISA試劑盒
PLD6 ELISA Kit鳥嘌呤核苷酸交換因子FARP2抗體磷脂酶D6(PLD6)ELISA試劑盒
PLD5 ELISA KitFK506結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白抗體磷脂酶D5(PLD5)ELISA試劑盒
PLD4 ELISA Kit成纖維細(xì)胞生長因子受體1原癌基因伴侶蛋白抗體磷脂酶D4(PLD4)ELISA試劑盒
PLD3 ELISA Kit鈣粘蛋白家族成員7抗體磷脂酶D3(PLD3)ELISA試劑盒
PLD ELISA KitⅢ型纖維連接蛋白域蛋白2/5抗體磷脂酶D(PLD)ELISA試劑盒
PLB ELISA Kit細(xì)絲蛋白A抗體磷脂酶B(PLB)ELISA試劑盒
PLA2R1 ELISA Kit磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體磷脂酶A2受體1(PLA2R1)ELISA試劑盒
PLAA ELISA Kit磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)ELISA試劑盒
PLA1 ELISA KitDNA損傷修復(fù)基因XRCC9抗體磷脂酶A1(PLA1)ELISA試劑盒
PHPT1 ELISA Kit磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體磷酸組氨酸性磷酸酶1(PHPT1)ELISA試劑盒
Php ELISA Kit磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體磷酸組氨酸(Php)ELISA試劑盒
PCK1 ELISA Kit磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1抗體磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)ELISA試劑盒
PSAT1 ELISA Kit磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體磷酸絲氨酸轉(zhuǎn)氨酶1(PSAT1)ELISA試劑盒
PSPH ELISA Kit叉頭蛋白N1抗體磷酸絲氨酸性磷酸酶(PSPH)ELISA試劑盒
PLM ELISA Kit磷酸化DNA損傷修復(fù)基因XRCC9抗體磷酸神經(jīng)膜蛋白(PLM)ELISA試劑盒
PGD ELISA KitⅢ型纖維連接蛋白域蛋白1抗體磷酸葡萄糖脫氫酶(PGD)ELISA試劑盒
PTEN ELISA KitⅢ型纖維連接蛋白域蛋白8抗體磷酸酶張力蛋白同源物(PTEN)ELISA試劑盒
PMVK ELISA KitⅢ型纖維連接蛋白域蛋白3B抗體磷酸甲羥戊酸激酶(PMVK)ELISA試劑盒
PIK3Cδ ELISA Kit粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體磷酸肌醇-3-激酶催化亞基δ肽(PIK3Cδ)ELISA試劑盒
PIK3Cβ ELISA Kit細(xì)胞生長抑制蛋白26/前列腺特異性膜抗原抗體樣蛋白抗體磷酸肌醇-3-激酶催化亞基β肽(PIK3Cβ)ELISA試劑盒
PI3K2α ELISA Kit腎母細(xì)胞瘤基因X染色體蛋白抗體磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)ELISA試劑盒
PFAS ELISA Kit磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體磷酸核糖甲酰甘氨酸脒合酶(PFAS)ELISA試劑盒
GART ELISA Kit腎母細(xì)胞瘤X蛋白抗體磷酸核糖甘氨酰胺轉(zhuǎn)甲酰基酶(GART)ELISA試劑盒
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
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