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水泡病毒(SVDV)核酸檢測(cè)試劑盒費(fèi)用說(shuō)明書(shū)
豬瘟病毒(CSFV)核酸檢測(cè)試劑盒費(fèi)用科研用
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
組成及試劑配制:
1、綿羊腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價(jià)格 |
綿羊腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家 | Ovine AdenovirusPCR | 電詢 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無(wú)菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無(wú)菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無(wú)菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測(cè),也可保存于-20℃待測(cè)。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見(jiàn)該試劑盒說(shuō)明書(shū)。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測(cè)混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽(yáng)性對(duì)照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測(cè)在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測(cè)選擇:選用FAM通道。
SAT1 ELISA Kit促性腺激素釋放激素受體抗體精脒/精胺N1-乙酰基轉(zhuǎn)移酶1(SAT1)ELISA試劑盒
SMOX ELISA Kit生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2抗體精胺氧化酶(SMOX)ELISA試劑盒
SMS ELISA KitGATA結(jié)合蛋白3抗體精胺合酶(SMS)ELISA試劑盒
ATE1 ELISA Kit粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體α抗體精氨?;D(zhuǎn)移酶1(ATE1)ELISA試劑盒
RNPEP ELISA Kit骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體精氨酰氨基肽酶(RNPEP)ELISA試劑盒
RARS ELISA Kit蛋白激酶GCN2蛋白抗體精氨酰tRNA合成酶(RARS)ELISA試劑盒
Arg2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR78蛋白抗體精氨酸酶Ⅱ(Arg2)ELISA試劑盒
VP ELISA KitG蛋白激活內(nèi)流鉀通道蛋白2抗體精氨酸加壓素原(VP)ELISA試劑盒
AVPR1A ELISA Kit生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體精氨酸加壓素受體1A(AVPR1A)ELISA試劑盒
SRSF2 ELISA Kit磷酸化生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體精氨酸/絲氨酸豐富剪接因子2(SRSF2)ELISA試劑盒
ASL ELISA Kit磷酸化糖原合酶激酶3β抗體精氨基琥珀酸裂解酶(ASL)ELISA試劑盒
ASS1 ELISA Kit磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體精氨基琥珀酸合成酶1(ASS1)ELISA試劑盒
NIT2 ELISA Kit磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體腈水解酶2(NIT2)ELISA試劑盒
NIT1 ELISA Kit磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體腈水解酶1(NIT1)ELISA試劑盒
CRYμ ELISA Kit磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體晶狀體蛋白μ(CRYμ)ELISA試劑盒
CRYλ1 ELISA Kit磷酸化葡萄糖合成酶1抗體晶狀體蛋白λ1(CRYλ1)ELISA試劑盒
CRYζ ELISA KitGCNT1葡萄糖轉(zhuǎn)移酶抗體晶狀體蛋白ζ(CRYζ)ELISA試劑盒
CRYαB ELISA Kit胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體相互作用蛋白1抗體晶狀體蛋白αB(CRYαB)ELISA試劑盒
TJP1 ELISA Kit鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶α1/GCS-α-1抗體緊密連接蛋白1(TJP1)ELISA試劑盒
MT4 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體125抗體金屬硫蛋白4(MT4)ELISA試劑盒
MT3 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體84抗體金屬硫蛋白3(MT3)ELISA試劑盒
MT1X ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體G2A抗體金屬硫蛋白1X(MT1X)ELISA試劑盒
MT1M ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體1抗體金屬硫蛋白1M(MT1M)ELISA試劑盒
MT1L ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體100抗體金屬硫蛋白1L(MT1L)ELISA試劑盒
MT1H ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體101抗體金屬硫蛋白1H(MT1H)ELISA試劑盒
MT1G ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體103抗體金屬硫蛋白1G(MT1G)ELISA試劑盒
MT1F ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體110抗體金屬硫蛋白1F(MT1F)ELISA試劑盒
MT1E ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體12抗體金屬硫蛋白1E(MT1E)ELISA試劑盒
MT1B ELISA Kit腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物/G蛋白偶聯(lián)受體124抗體金屬硫蛋白1B(MT1B)ELISA試劑盒
MT1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體58抗體金屬硫蛋白1(MT1)ELISA試劑盒
MPPE1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體128抗體金屬磷酸酯酶1(MPPE1)ELISA試劑盒
MPS1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體128抗體金屬泛激蛋白1(MPS1)ELISA試劑盒
ADAM9 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體146抗體解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒
ADAM8 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體146抗體解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒
ADAM33 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體17抗體解整合素金屬蛋白酶33(ADAM33)ELISA試劑盒
ADAM28 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體19抗體解整合素金屬蛋白酶28(ADAM28)ELISA試劑盒
ADAM22 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體20抗體解整合素金屬蛋白酶22(ADAM22)ELISA試劑盒
ADAM19 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體21抗體解整合素金屬蛋白酶19(ADAM19)ELISA試劑盒
ADAM17 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體22抗體解整合素金屬蛋白酶17(ADAM17)ELISA試劑盒
ADAM15 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體25抗體解整合素金屬蛋白酶15(ADAM15)ELISA試劑盒
ADAM12 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體26抗體解整合素金屬蛋白酶12(ADAM12)ELISA試劑盒
ADAM10 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體27抗體解整合素金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒
DSTN ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體3抗體解聚蛋白(DSTN)ELISA試劑盒
MACC1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體31抗體結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移關(guān)聯(lián)基因1(MACC1)ELISA試劑盒
PER1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體32抗體節(jié)律晝夜蛋白1(PER1)ELISA試劑盒
CNTNAP4 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體34抗體接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白4(CNTNAP4)ELISA試劑盒
CNTNAP2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體35抗體接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(CNTNAP2)ELISA試劑盒
CNTNAP1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體37/帕金森相關(guān)內(nèi)皮素受體樣受體抗體接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白1(CNTNAP1)ELISA試劑盒
C
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
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