組成及試劑配制:
1、細(xì)刺奧斯特線蟲PCR檢測試劑盒說明書酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應(yīng)管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進行PCR擴增反應(yīng)。
4. PCR擴增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃，反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。

PRSS33 ELISA KitELAVL2+ELAVL4蛋白抗體絲氨酸蛋白酶33(PRSS33)ELISA試劑盒
PRSS31 ELISA Kit同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN1抗體絲氨酸蛋白酶31(PRSS31)ELISA試劑盒
PRSS3 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體絲氨酸蛋白酶23(PRSS3)ELISA試劑盒
PRSS23 ELISA Kit谷氨酸受體KA1抗體絲氨酸蛋白酶23(PRSS23)ELISA試劑盒
PRSS21 ELISA Kit真核翻譯起始因子3K抗體絲氨酸蛋白酶21(PRSS21)ELISA試劑盒
PRSS2 ELISA Kit早期生長反應(yīng)蛋白3抗體絲氨酸蛋白酶2(PRSS2)ELISA試劑盒
PRSS12 ELISA KitEMSY蛋白抗體絲氨酸蛋白酶12(PRSS12)ELISA試劑盒
PRSS1 ELISA KitFBXO36 F-box蛋白相關(guān)蛋白36抗體絲氨酸蛋白酶1(PRSS1)ELISA試劑盒
STK4 ELISA KitT1蛋白抗體絲氨酸/蘇氨酸激酶4(STK4)ELISA試劑盒
STK39 ELISA KitRAB6蛋白抗體絲氨酸/蘇氨酸激酶39(STK39)ELISA試劑盒
STK3 ELISA Kit皮卡丘素抗體絲氨酸/蘇氨酸激酶3(STK3)ELISA試劑盒
STK25 ELISA KitELAVL4蛋白抗體絲氨酸/蘇氨酸激酶25(STK25)ELISA試劑盒
STK19 ELISA Kit表皮生長因子樣激素受體1絲氨酸/蘇氨酸激酶19(STK19)ELISA試劑盒
STK16 ELISA Kit磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體絲氨酸/蘇氨酸激酶16(STK16)ELISA試劑盒
STK11 ELISA Kit電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白α抗體絲氨酸/蘇氨酸激酶11(STK11)ELISA試劑盒
STK10 ELISA Kit前列腺素E受體蛋白4抗體絲氨酸/蘇氨酸激酶10(STK10)ELISA試劑盒
STYK1 ELISA Kit風(fēng)疹病毒糖蛋白抗體絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸激酶1(STYK1)ELISA試劑盒
ACO2 ELISA KitEFR3A蛋白抗體順烏頭酸酶2(ACO2)ELISA試劑盒
ACO1 ELISA KitENAH蛋白抗體順烏頭酸酶1(ACO1)ELISA試劑盒
ADI1 ELISA Kit乙基丙二酸腦病蛋白抗體順式還原酮加雙氧酶1(ADI1)ELISA試劑盒
AQP8 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體水通道蛋白8(AQP8)ELISA試劑盒
AQP7 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子E2F-5抗體水通道蛋白7(AQP7)ELISA試劑盒
AQP12B ELISA KitDNA切除修復(fù)蛋白1抗體水通道蛋白12B(AQP12B)ELISA試劑盒
AQP12 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子E2F6抗體水通道蛋白12(AQP12)ELISA試劑盒
AQP11 ELISA Kit膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運載蛋白2抗體水通道蛋白11(AQP11)ELISA試劑盒
AQP10 ELISA Kit膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運載蛋白3抗體水通道蛋白10(AQP10)ELISA試劑盒
DUOX2 ELISA Kit內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗體雙氧化酶2(DUOX2)ELISA試劑盒
DUOX1 ELISA Kit嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白抗體雙氧化酶1(DUOX1)ELISA試劑盒
AREGB ELISA Kit類表皮生長因子域7抗體雙調(diào)蛋白B(AREGB)ELISA試劑盒
AREG ELISA Kitα彈性蛋白抗體雙調(diào)蛋白(AREG)ELISA試劑盒
DUSP9 ELISA Kit黃熱病毒包膜糖蛋白抗體雙特異性磷酸酶9(DUSP9)ELISA試劑盒
DUSP6 ELISA KitHER2受體抗體雙特異性磷酸酶6(DUSP6)ELISA試劑盒
DUSP5 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子E2F-4抗體雙特異性磷酸酶5(DUSP5)ELISA試劑盒
DUSP1 ELISA Kit磷酸化表皮生長因子受體抗體雙特異性磷酸酶1(DUSP1)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。