組成及試劑配制:
1、西方蜜蜂微孢子蟲PCR檢測試劑盒品牌酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應(yīng)管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測在60℃，反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。

CHAD ELISA Kit大腸桿菌埃希桿菌O6抗體軟骨粘附素(CHAD)ELISA試劑盒
GP39 ELISA Kit植物延展素-β軟骨糖蛋白39(GP39)ELISA試劑盒
CHODL ELISA Kit內(nèi)皮素-1抗體軟骨凝集蛋白(CHODL)ELISA試劑盒
CRTAP ELISA Kit絲裂原活化蛋白激酶4抗體軟骨關(guān)聯(lián)蛋白(CRTAP)ELISA試劑盒
MFGE8 ELISA Kit埃茲蛋白抗體乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)ELISA試劑盒
Maspin ELISA Kit細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體絲抑蛋白(Maspin)ELISA試劑盒
BRCA2 ELISA Kit內(nèi)皮素-1單克隆抗體癌易感蛋白2(BRCA2)ELISA試劑盒
BRCA1 ELISA Kit腸道病毒71型抗體癌易感蛋白1(BRCA1)ELISA試劑盒
BCAR1 ELISA Kit抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體癌抗雌激素藥物耐藥性基因1(BCAR1)ELISA試劑盒
LTF ELISA Kit表皮生長因子抗體乳鐵傳遞蛋白(LTF)ELISA試劑盒
LCT ELISA Kit表皮生長因子抗體乳糖酶(LCT)ELISA試劑盒
LDHC ELISA Kit磷酸化真核翻譯延長因子2抗體乳酸脫氫酶C(LDHC)ELISA試劑盒
LDHB ELISA Kit真核延伸因子激酶2抗體乳酸脫氫酶B(LDHB)ELISA試劑盒
CPT2 ELISA Kit磷酸化真核延伸因子激酶2抗體肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶2(CPT2)ELISA試劑盒
CPT1B ELISA Kit真核啟動因子2α抗體肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶1B(CPT1B)ELISA試劑盒
CPT1A ELISA Kit磷酸化一氧化氮合成酶3抗體肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)ELISA試劑盒
CT2 ELISA Kit真核翻譯延長因子2抗體肉毒堿轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(CT2)ELISA試劑盒
CRAT ELISA Kit癌基因ERG3抗體肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CRAT)ELISA試劑盒
CORT ELISA Kit豬源產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌K88-K99抗體肉毒堿-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(CORT)ELISA試劑盒
FUS ELISA KitFAS凋亡抑制分子3抗體融合蛋白(FUS)ELISA試劑盒
SLC3A2 ELISA Kit纖維束1抗體溶質(zhì)載體家族3成員2(SLC3A2)ELISA試劑盒
SLC39A6 ELISA Kit叉頭蛋白P3抗體溶質(zhì)載體家族39成員6(SLC39A6)ELISA試劑盒
SLC30A8 ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受體I溶質(zhì)載體家族30成員8(SLC30A8)ELISA試劑盒
SLC26A4 ELISA Kit叉頭蛋白M1抗體溶質(zhì)載體家族26成員4(SLC26A4)ELISA試劑盒
SLC1A5 ELISA Kit磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體溶質(zhì)載體家族1成員5(SLC1A5)ELISA試劑盒
SLC16A3 ELISA Kit磷酸化粘著斑激酶抗體溶質(zhì)載體家族16成員3(SLC16A3)ELISA試劑盒
SLC16A1 ELISA Kit絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體溶質(zhì)載體家族16成員1(SLC16A1)ELISA試劑盒
LPCAT4 ELISA Kit肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體溶血卵磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶4(LPCAT4)ELISA試劑盒
LPCAT3 ELISA Kit凝血因子13抗體溶血卵磷脂?；D(zhuǎn)移酶3(LPCAT3)ELISA試劑盒
LPCAT2 ELISA Kit濾泡樹突細(xì)胞分泌蛋白抗體溶血卵磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶2(LPCAT2)ELISA試劑盒
LPCAT1 ELISA Kit纖維母細(xì)胞生長因子13抗體溶血卵磷脂?；D(zhuǎn)移酶1(LPCAT1)ELISA試劑盒
LPEAT1 ELISA Kit骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體溶血磷脂酰乙醇胺酰基轉(zhuǎn)移酶1(LPEAT1)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。