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產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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適用領域 | 科研 |
組成及試劑配制:
1、55諾如病毒5型PCR檢測試劑盒廠家酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
55諾如病毒5型PCR檢測試劑盒廠家 | Abalone Spherical VirusPCR | 電詢 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃,反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
CCR6 ELISA Kit胎球蛋白A趨化因子C-C-基元受體6(CCR6)ELISA試劑盒
CCR5 ELISA Kit叉頭蛋白L2抗體趨化因子C-C-基元受體5(CCR5)ELISA試劑盒
CCR4 ELISA Kit叉頭相關轉(zhuǎn)錄因子3抗體趨化因子C-C-基元受體4(CCR4)ELISA試劑盒
CCR3 ELISA Kit鐵蛋白抗體趨化因子C-C-基元受體3(CCR3)ELISA試劑盒
CCR2 ELISA KitFMS樣酪氨酸激酶3配體抗體趨化因子C-C-基元受體2(CCR2)ELISA試劑盒
CCR1 ELISA Kit堿性成纖維細胞生長因子9抗體趨化因子C-C-基元受體1(CCR1)ELISA試劑盒
CCL3L1 ELISA Kit原癌基因酪氨酸蛋白激酶FES抗體趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)ELISA試劑盒
CCL14 ELISA Kit成纖維細胞生長因子16抗體趨化因子C-C-基元配體14(CCL14)ELISA試劑盒
CHEM ELISA Kit成纖維細胞激活蛋白α抗體趨化素(CHEM)ELISA試劑盒
KTN1 ELISA KitFas相關磷酸酶1抗體驅(qū)動結合蛋白1(KTN1)ELISA試劑盒
KNCN ELISA Kit葉酸受體4抗體驅(qū)動結合蛋白(KNCN)ELISA試劑盒
KIF5A ELISA KitWnt信號受體蛋白抗體驅(qū)動蛋白家族成員5A(KIF5A)ELISA試劑盒
KIF20A ELISA Kit磷酸化載脂蛋白A1抗體驅(qū)動蛋白家族成員20A(KIF20A)ELISA試劑盒
KIF1A ELISA Kit磷酸化載脂蛋白A1抗體驅(qū)動蛋白家族成員1A(KIF1A)ELISA試劑盒
KIF18A ELISA Kit磷酸化堿性成纖維細胞生長因子受體1抗體驅(qū)動蛋白家族成員18A(KIF18A)ELISA試劑盒
KIF14 ELISA Kit脂肪酸酰胺水解酶1抗體驅(qū)動蛋白家族成員14(KIF14)ELISA試劑盒
KNS2 ELISA Kit細胞外基質(zhì)蛋白FRAS1抗體驅(qū)動蛋白2(KNS2)ELISA試劑盒
MPST ELISA Kit富馬酸水合酶抗體巰基丙酮酸硫轉(zhuǎn)移酶(MPST)ELISA試劑盒
HVCN1 ELISA Kit成纖維細胞生長因子21抗體氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)ELISA試劑盒
FTL ELISA Kit核仁纖維蛋白抗體輕肽鐵蛋白(FTL)ELISA試劑盒
NEFL ELISA Kit鐵蛋白輕鏈抗體輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL)ELISA試劑盒
AFTPH ELISA Kit肝細胞核因子3抗體親尾蛋白(AFTPH)ELISA試劑盒
CYPD ELISA Kit果糖1,6-二磷酸酯酶抗體親環(huán)素D(CYPD)ELISA試劑盒
CYPB ELISA Kit6磷酸果糖激酶抗體親環(huán)素B(CYPB)ELISA試劑盒
CYPA ELISA Kit肌肉果糖二磷酸酶抗體親環(huán)素A(CYPA)ELISA試劑盒
KPNβ ELISA Kit纖維蛋白原γ鏈抗體親核素β(KPNβ)ELISA試劑盒
KPNα7 ELISA Kit纖維蛋白肽B抗體親核素α7(KPNα7)ELISA試劑盒
KPNα6 ELISA Kit原癌基因c FGR抗體親核素α6(KPNα6)ELISA試劑盒
KPNα5 ELISA Kit肢體畸形相關蛋白FHOD1抗體親核素α5(KPNα5)ELISA試劑盒
KPNα4 ELISA Kit磷酸化肢體畸形相關蛋白FHOD1抗體親核素α4(KPNα4)ELISA試劑盒
KPNα3 ELISA Kit纖連蛋白2抗體親核素α3(KPNα3)ELISA試劑盒
KPNα2 ELISA Kit纖連蛋白7抗體親核素α2(KPNα2)ELISA試劑盒
KPNα1 ELISA Kit彈性蛋白結合蛋白Fcn2抗體親核素α1(KPNα1)ELISA試劑盒
PLP1 ELISA Kit范可尼綜合征相關蛋白FAN1抗體鞘磷脂脂質(zhì)蛋白1(PLP1)ELISA試劑盒
SMPD4 ELISA Kit范可尼貧血組蛋白A抗體鞘磷脂磷酸二酯酶4(SMPD4)ELISA試劑盒
SMPD3 ELISA Kit卷曲蛋白3抗體鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)ELISA試劑盒
SGMS2 ELISA Kit細胞分裂周期樣蛋白20抗體鞘磷脂合酶2(SGMS2)ELISA試劑盒
SGMS1 ELISA Kit鐵氧化還原蛋白還原酶抗體鞘磷脂合酶1(SGMS1)ELISA試劑盒
MPZ ELISA Kit磷酸化堿性成纖維細胞生長因子受體1抗體鞘磷脂蛋白0(MPZ)ELISA試劑盒
SPH ELISA Kit甲精結合蛋白17抗體鞘磷脂(SPH)ELISA試劑盒
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
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