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產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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組成及試劑配制:
1、奈瑟菌通用PCR檢測試劑盒價格酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
奈瑟菌通用PCR檢測試劑盒價格 | Abalone Spherical VirusPCR | 電詢 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃,反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
Anti-CⅡAb ELISA Kit糖皮質(zhì)激素誘導亮氨酸拉鏈蛋白抗體人抗Ⅱ型膠原蛋白抗體(Anti-CⅡAb)ELISA試劑盒
UACA ELISA Kitγ-谷氨酰轉肽酶6抗體卷曲域錨蛋白重復序列葡萄膜自身抗原(UACA)ELISA試劑盒
FZD9 ELISA KitG氨基丁酸受體δ/GABAA Rδ抗體卷曲同源物9(FZD9)ELISA試劑盒
FZD8 ELISA KitG氨基丁酸受體γ1/GABAA Rγ1抗體卷曲同源物8(FZD8)ELISA試劑盒
FZD7 ELISA Kit磷酸化γ氨基丁酸γ2受體抗體卷曲同源物7(FZD7)ELISA試劑盒
FZD6 ELISA KitG氨基丁酸受體γ3/GABAA Rγ3抗體卷曲同源物6(FZD6)ELISA試劑盒
FZD5 ELISA KitG氨基丁酸受體ε/GABAA Rε抗體卷曲同源物5(FZD5)ELISA試劑盒
FZD4 ELISA Kitγ-氨基丁酸受體相關蛋白抗體卷曲同源物4(FZD4)ELISA試劑盒
FZD3 ELISA KitG氨基丁酸A型受體θ/GABAA Rθ抗體卷曲同源物3(FZD3)ELISA試劑盒
FZD2 ELISA KitG氨基丁酸A型受體rho1 /GABAA Rρ1抗體卷曲同源物2(FZD2)ELISA試劑盒
FZD10 ELISA KitG氨基丁酸A型受體rho2 /GABAA Rρ2抗體卷曲同源物10(FZD10)ELISA試劑盒
FZD1 ELISA KitG氨基丁酸B型受體結合蛋白抗體卷曲同源物1(FZD1)ELISA試劑盒
AGC ELISA Kit谷氨酸受體δ1/GluR-δ1抗體聚集蛋白聚糖(AGC)ELISA試劑盒
GAN ELISA Kit谷氨酸受體相關蛋白1抗體巨軸索神經(jīng)蛋白(GAN)ELISA試劑盒
MAEA ELISA Kit環(huán)磷酸鳥苷門控通道蛋白CNG4抗體巨噬細胞幼紅細胞黏附蛋白(MAEA)ELISA試劑盒
MIP5 ELISA Kit甘氨酸受體α1+甘氨酸受體α2抗體巨噬細胞炎性蛋白5(MIP5)ELISA試劑盒
MIP4α ELISA Kit甘氨酸受體α3/GlyR α3抗體巨噬細胞炎性蛋白4α(MIP4α)ELISA試劑盒
MIP3β ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體C5家族亞型D抗體巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP3β)ELISA試劑盒
MIP3α ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體18抗體巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP3α)ELISA試劑盒
MIP1β ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體65抗體巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA試劑盒
MIP1α ELISA Kit生長終止特異性同源盒基因抗體巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP1α)ELISA試劑盒
MDC ELISA Kit谷氨酸受體2抗體巨噬細胞來源趨化因子(MDC)ELISA試劑盒
MCSF ELISA Kit谷氨酸受體3抗體巨噬細胞集落刺激因子(MCSF)ELISA試劑盒
MPG1 ELISA Kit谷氨酸受體4抗體巨噬細胞表達基因1蛋白(MPG1)ELISA試劑盒
MCK ELISA Kit促代謝型谷氨酸受體1抗體巨肌酸激酶(MCK)ELISA試劑盒
QSOX1 ELISA Kit甘氨酸受體α4抗體靜止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)ELISA試劑盒
SPG11 ELISA Kit生長分化因子8抗體痙攣性截癱蛋白11(SPG11)ELISA試劑盒
SPAST ELISA Kit磷酸化糖原合酶激酶-3β抗體痙攣蛋白(SPAST)ELISA試劑盒
SHPK ELISA KitGlu-Glu tag抗體景天庚酮糖激酶(SHPK)ELISA試劑盒
SSFA2 ELISA Kit胰高血糖素樣肽-2抗體特異性抗原2(SSFA2)ELISA試劑盒
Sp17 ELISA Kit甘氨酸受體alpha 1/2/3型抗體蛋白17(Sp17)ELISA試劑盒
SAT2 ELISA Kit抑制型G蛋白α3抗體精脒/精胺N1-乙酰基轉移酶2(SAT2)ELISA試劑盒
SAT1 ELISA Kit促性腺激素釋放激素受體抗體精脒/精胺N1-乙?;D移酶1(SAT1)ELISA試劑盒
SMOX ELISA Kit生長因子受體結合蛋白2抗體精胺氧化酶(SMOX)ELISA試劑盒
SMS ELISA KitGATA結合蛋白3抗體精胺合酶(SMS)ELISA試劑盒
ATE1 ELISA Kit粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體α抗體精氨?;D移酶1(ATE1)ELISA試劑盒
RNPEP ELISA Kit骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體精氨酰氨基肽酶(RNPEP)ELISA試劑盒
RARS ELISA Kit蛋白激酶GCN2蛋白抗體精氨酰tRNA合成酶(RARS)ELISA試劑盒
Arg2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR78蛋白抗體精氨酸酶Ⅱ(Arg2)ELISA試劑盒
VP ELISA KitG蛋白激活內(nèi)流鉀通道蛋白2抗體精氨酸加壓素原(VP)ELISA試劑盒
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
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