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水泡病毒(SVDV)核酸檢測(cè)試劑盒費(fèi)用說明書
豬瘟病毒(CSFV)核酸檢測(cè)試劑盒費(fèi)用科研用
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
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組成及試劑配制:
1、豬滑液支原體PCR檢測(cè)試劑盒廠家酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價(jià)格 |
豬滑液支原體PCR檢測(cè)試劑盒廠家 | Abalone Spherical VirusPCR | 電詢 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測(cè),也可保存于-20℃待測(cè)。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測(cè)混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對(duì)照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測(cè)在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測(cè)選擇:選用FAM通道。
IFNα17 ELISA Kit糖原合酶激酶3α+β抗體干擾素α17(IFNα17)ELISA試劑盒
IFNα16 ELISA KitG2期/S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體干擾素α16(IFNα16)ELISA試劑盒
IFNα14 ELISA Kit生長(zhǎng)分化因子8/肌肉抑制素抗體干擾素α14(IFNα14)ELISA試劑盒
IFNα13 ELISA Kit磷酸化糖原合酶激酶3α/β抗體干擾素α13(IFNα13)ELISA試劑盒
IFNα10 ELISA KitSEC63域內(nèi)含蛋白1抗體干擾素α10(IFNα10)ELISA試劑盒
IFNα/βR2 ELISA KitA型禽流感病毒H7N9 M1蛋白抗體干擾素α/β受體2(IFNα/βR2)ELISA試劑盒
IFNα/βR1 ELISA Kit人類狀瘤病毒33 E6蛋白抗體干擾素α/β受體(IFNα/βR1)ELISA試劑盒
IFNα ELISA KitBeta氨基己糖苷酶beta亞基蛋白A鏈抗體干擾素α(IFNα)ELISA試劑盒
LIPC ELISA Kit磷酸化熱休克蛋白-70抗體肝脂酶(LIPC)ELISA試劑盒
PFKL ELISA Kit磷酸化熱休克蛋白-70抗體肝臟磷酸果糖激酶(PFKL)ELISA試劑盒
FABP1 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框38抗體肝型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP1)ELISA試劑盒
HGFR ELISA Kit乙酰肝素酶抗體肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(HGFR)ELISA試劑盒
HCRP1 ELISA Kit乙酰肝素酶2抗體肝細(xì)胞癌相關(guān)蛋白1(HCRP1)ELISA試劑盒
HPA2 ELISA Kit人血清抗體肝素酶2(HPA2)ELISA試劑盒
HPA ELISA Kit血紅素氧合酶 1/熱休克蛋白32抗體肝素酶(HPA)ELISA試劑盒
HBEGF ELISA Kit磷酸化HER3受體抗體肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HBEGF)ELISA試劑盒
LRH1 ELISA Kit磷酸化組蛋白去乙?;?/5/7抗體肝受體同源物1(LRH1)ELISA試劑盒
ALPL ELISA Kit異染色質(zhì)蛋白1-γ抗體肝腎骨堿性磷酸酶(ALPL)ELISA試劑盒
EFNB3 ELISA Kit組蛋白H1抗體肝配蛋白B3(EFNB3)ELISA試劑盒
EFNB2 ELISA Kit組蛋白去乙酰化酶1抗體肝配蛋白B2(EFNB2)ELISA試劑盒
EFNB1 ELISA KitHAUS3蛋白抗體肝配蛋白B1(EFNB1)ELISA試劑盒
EPHA3 ELISA Kit熱休克蛋白93抗體肝配蛋白A受體3(EPHA3)ELISA試劑盒
EPHA10 ELISA Kit磷酸化組蛋白去乙?;?抗體肝配蛋白A受體10(EPHA10)ELISA試劑盒
EPHA1 ELISA Kit組蛋白H2B抗體肝配蛋白A受體1(EPHA1)ELISA試劑盒
EFNA5 ELISA Kit短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶抗體肝配蛋白A5(EFNA5)ELISA試劑盒
EFNA4 ELISA Kit組蛋白去乙?;?抗體肝配蛋白A4(EFNA4)ELISA試劑盒
EFNA3 ELISA Kit組蛋白去乙?;?0抗體肝配蛋白A3(EFNA3)ELISA試劑盒
EFNA2 ELISA KitHOXB4抗體肝配蛋白A2(EFNA2)ELISA試劑盒
EFNA1 ELISA Kit磷酸化HER2受體抗體肝配蛋白A1(EFNA1)ELISA試劑盒
CLL1 ELISA Kit組蛋白去乙?;?抗體肝膠原凝集素1(CLL1)ELISA試劑盒
CDH17 ELISA Kit磷酸化組蛋白去乙酰化酶6抗體肝腸鈣黏蛋白(CDH17)ELISA試劑盒
HDGF ELISA Kit組蛋白去乙?;?抗體肝癌源性生長(zhǎng)因子(HDGF)ELISA試劑盒
GLYCTK ELISA Kit磷酸化組蛋白去乙?;?抗體甘油酸激酶(GLYCTK)ELISA試劑盒
GAPDH ELISA Kit組蛋白去乙?;?抗體甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)ELISA試劑盒
GPIHBP1 ELISA Kit磷酸化HER4抗體甘油磷酸肌醇錨定高密度脂蛋白結(jié)合蛋白1(GPIHBP1)ELISA試劑盒
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
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