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產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
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組成及試劑配制:
1、貓支原體PCR檢測試劑盒價(jià)格酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價(jià)格 |
貓支原體PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Abalone Spherical VirusPCR | 電詢 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
OC90 ELISA Kit組織胺H4受體抗體耳椎蛋白90(OC90)ELISA試劑盒
OTOR ELISA KitmRNA cap甲基轉(zhuǎn)移酶抗體耳纖維細(xì)胞源性蛋白(OTOR)ELISA試劑盒
OTOS ELISA Kit5’-三磷酸聚核苷酸抗體耳蝸蛋白(OTOS)ELISA試劑盒
OTOL1 ELISA Kit組氨酸三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體耳石蛋白1(OTOL1)ELISA試劑盒
OTOA ELISA Kit甲狀腺促進(jìn)激素alpha鏈耳錨蛋白(OTOA)ELISA試劑盒
OTOG ELISA KitA型流感病毒H7N9凝集素抗體耳膠蛋白(OTOG)ELISA試劑盒
OTOF ELISA Kit組蛋白去乙?;?抗體耳畸蛋白(OTOF)ELISA試劑盒
OTOP3 ELISA Kit人乙肝表面抗原抗體抗體耳蝶呤3(OTOP3)ELISA試劑盒
OTOP2 ELISA Kit腎損傷分子1抗體耳蝶呤2(OTOP2)ELISA試劑盒
O* ELISA Kit組氨酸富含脯氨酸糖蛋白抗體耳蝶呤1(O*)ELISA試劑盒
COMT ELISA KitHER3受體抗體兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)ELISA試劑盒
ATCAY ELISA Kit磷酸化HER3受體抗體鱷失調(diào)蛋白(ATCAY)ELISA試劑盒
PLUNC ELISA Kit磷酸化HER3受體抗體腭/肺/鼻上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白(PLUNC)ELISA試劑盒
DMBT1 ELISA Kit磷酸化HER4抗體惡性腦腫瘤缺失蛋白1(DMBT1)ELISA試劑盒
MRP1 ELISA Kit糖蛋白β-1B抗體多藥耐藥關(guān)聯(lián)蛋白1(MRP1)ELISA試劑盒
PLAGL1 ELISA Kit磷酸化熱休克蛋白27抗體多型性腺瘤基因樣蛋白1(PLAGL1)ELISA試劑盒
PLRG1 ELISA KitHEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白7A蛋白抗體多效調(diào)節(jié)因子1(PLRG1)ELISA試劑盒
DPAGT1 ELISA Kit人瘤病毒16型E7抗體多萜醇磷酸-N-乙酰氨基葡萄糖磷酸轉(zhuǎn)移酶1(DPAGT1)ELISA試劑盒
GALNT9 ELISA KitHER2抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶9(GALNT9)ELISA試劑盒
GALNT8 ELISA Kit人胎盤泌乳素抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶8(GALNT8)ELISA試劑盒
GALNT7 ELISA Kit熱休克蛋白27抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶7(GALNT7)ELISA試劑盒
GALNT6 ELISA Kit高遷移率族蛋白A1抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶6(GALNT6)ELISA試劑盒
GALNT5 ELISA Kit磷酸化HER2受體抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶5(GALNT5)ELISA試劑盒
GALNT4 ELISA Kit熱休克蛋白-20抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶4(GALNT4)ELISA試劑盒
GALNT3 ELISA Kit羥乙基淀粉抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶3(GALNT3)ELISA試劑盒
GALNT2 ELISA KitA型流感病毒H1N1-M2蛋白抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶2(GALNT2)ELISA試劑盒
GALNT14 ELISA Kit亨丁頓舞蹈癥相互作用蛋白12抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶14(GALNT14)ELISA試劑盒
GALNT13 ELISA Kit單純皰疹病毒1型DNA聚合酶催化亞單位抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶13(GALNT13)ELISA試劑盒
GALNT12 ELISA Kit人乙型肝炎核心抗原抗體單克隆抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶12(GALNT12)ELISA試劑盒
GALNT11 ELISA Kit磷酸化熱休克蛋白27抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶11(GALNT11)ELISA試劑盒
GALNT10 ELISA Kit聚組氨酸抗體g標(biāo)簽抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶10(GALNT10)ELISA試劑盒
GALNT1 ELISA Kit磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶1(GALNT1)ELISA試劑盒
SDC4 ELISA KitHER2受體抗體多配體蛋白聚糖4(SDC4)ELISA試劑盒
SDC3 ELISA Kit環(huán)化核苷酸調(diào)控陽離子通道蛋白亞型4多配體蛋白聚糖3(SDC3)ELISA試劑盒
SDC1 ELISA KitHEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白8蛋白抗體多配體蛋白聚糖1(SDC1)ELISA試劑盒
PIGR ELISA Kit雄激素調(diào)節(jié)樣蛋白抗體多聚免疫球蛋白受體(PIGR)ELISA試劑盒
MMRN2 ELISA Kit雄激素調(diào)節(jié)蛋白2抗體多聚蛋白2(MMRN2)ELISA試劑盒
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
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