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水泡病毒(SVDV)核酸檢測(cè)試劑盒費(fèi)用說(shuō)明書(shū)
豬瘟病毒(CSFV)核酸檢測(cè)試劑盒費(fèi)用科研用
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
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組成及試劑配制:
1、副結(jié)核分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價(jià)格 |
副結(jié)核分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) | Abalone Spherical VirusPCR | 電詢 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無(wú)菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無(wú)菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無(wú)菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測(cè),也可保存于-20℃待測(cè)。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見(jiàn)該試劑盒說(shuō)明書(shū)。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測(cè)混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽(yáng)性對(duì)照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測(cè)在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測(cè)選擇:選用FAM通道。
δLK1 ELISA Kit白細(xì)胞介素-10抗體δ樣蛋白1同源物(δLK1)ELISA試劑盒
δSIP ELISA Kit白介素6抗體δ-促睡眠肽(δSIP)ELISA試劑盒
γGT1 ELISA Kit磷酸化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶1(γGT1)ELISA試劑盒
γGH ELISA Kit白細(xì)胞介素28受體抗體γ-谷氨酰水解酶(γGH)ELISA試劑盒
γGT7 ELISA KitKB抑制蛋白激酶Ζ抗體γ-谷氨?;D(zhuǎn)氨酶7(γGT7)ELISA試劑盒
γGT6 ELISA Kit胰島素基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1抗體γ-谷氨?;D(zhuǎn)氨酶6(γGT6)ELISA試劑盒
γGT5 ELISA Kit整合素β1結(jié)合蛋白2抗體γ-谷氨?;D(zhuǎn)氨酶5(γGT5)ELISA試劑盒
γGT3 ELISA Kit線粒體翻譯起始因子3抗體γ-谷氨?;D(zhuǎn)氨酶3(γGT3)ELISA試劑盒
γGT2 ELISA Kit白細(xì)胞介素27β抗體γ-谷氨?;D(zhuǎn)氨酶2(γGT2)ELISA試劑盒
γGCT ELISA Kit胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體抗體γ-谷氨酰環(huán)化轉(zhuǎn)移酶(γGCT)ELISA試劑盒
γLPH ELISA KitFBXL11蛋白抗體γ-促脂解激素(γLPH)ELISA試劑盒
γABA ELISA Kit免疫球蛋白超家族成員21抗體γ-氨基丁酸(γABA)ELISA試劑盒
βTG ELISA Kit白介素9抗體β-血小板球蛋白(βTG)ELISA試劑盒
βTC ELISA Kit乙酰乳酸合成酶蛋白抗體β細(xì)胞素(βTC)ELISA試劑盒
βACE2 ELISA Kit異檸檬酸脫氫酶1抗體β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(βACE2)ELISA試劑盒
βACE1 ELISA KitIKK激酶相互作用蛋白抗體β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)ELISA試劑盒
OHβ ELISA Kit磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體β-羥丁酸(OHβ)ELISA試劑盒
βEP ELISA Kit白介素8抗體β-內(nèi)啡肽(βEP)ELISA試劑盒
βCTx ELISA KitIroquois同源蛋白5抗體β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)ELISA試劑盒
βLPH ELISA Kit整合素αE抗體Integrin αEβ-促脂素(βLPH)ELISA試劑盒
β2M ELISA Kit細(xì)胞間粘附分子-2抗體β2-微球蛋白(β2M)ELISA試劑盒
β4GALT1 ELISA Kit整合素β3抗體β-1,4-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1(β4GALT1)ELISA試劑盒
β4GALNT2 ELISA Kit整合素α4抗體β-1,4-N-乙酰半乳糖胺基轉(zhuǎn)移酶2(β4GALNT2)ELISA試劑盒
β3GAT1 ELISA Kit白介素15抗體β-1,3-葡糖醛酸基移酶1(β3GAT1)ELISA試劑盒
αHSP ELISA Kit磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體α-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)ELISA試劑盒
αLA ELISA Kit一氧化氮合成酶-2抗體α-乳清蛋白(αLA)ELISA試劑盒
αEP ELISA Kit干擾素α6抗體α-內(nèi)啡肽(αEP)ELISA試劑盒
αMSH ELISA Kit整合素β2/Integrin β2抗體α-黑色素細(xì)胞刺激素(αMSH)ELISA試劑盒
αCTx ELISA Kit抑制素A/Inhibin βA抗體α-骨膠原交聯(lián)(αCTx)ELISA試劑盒
SPTAN1 ELISA Kit胰島素受體底物-3抗體α-胞襯蛋白(SPTAN1)ELISA試劑盒
AFM ELISA Kit胰島素受體底物p53蛋白抗體α白蛋白(AFM)ELISA試劑盒
α2PI ELISA Kit胰島素受體底物-1抗體α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)ELISA試劑盒
α2ML1 ELISA Kit胰島素受體底物-2抗體α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)ELISA試劑盒
α2M ELISA Kit胰島素受體底物-4抗體α2-巨球蛋白(α2M)ELISA試劑盒
αHSG ELISA Kit白介素14抗體α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒
α1M ELISA Kit腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員抗體α1-微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒
α1AGP ELISA KitCaspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA試劑盒
α1ACT ELISA Kit胰島素受體α抗體α1-抗胰糜蛋白酶(α1ACT)ELISA試劑盒
α1AT ELISA Kit整合素α3β1抗體α1-抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA試劑盒
α1BG ELISA Kit整合素β7抗體α1-B-糖蛋白(α1BG)ELISA試劑盒
ZIN ELISA Kit支架蛋白抗體Zinedin蛋白(ZIN)ELISA試劑盒
EZH2 ELISA Kit非洲爪蟾IGC抗體Zeste同源物增強(qiáng)子2(EZH2)ELISA試劑盒
EZH1 ELISA Kit干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體Zeste同源物增強(qiáng)子1(EZH1)ELISA試劑盒
SUZ12 ELISA Kit干擾素β抗體Zeste12同源物1抑制因子2(SUZ12)ELISA試劑盒
Tβ4Y ELISA Kitγ-干擾素/γ-IFN單克隆抗體Y-染色體胸腺素β4(Tβ4Y)ELISA試劑盒
PYY3 ELISA Kit干擾素-γ/IFN-γ抗體YY肽3(PYY3)ELISA試劑盒
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
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