當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 膿腫分枝桿菌廠家
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
組成及試劑配制:
1、膿腫分枝桿菌廠家酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
膿腫分枝桿菌廠家 | Abalone Spherical VirusPCR | 電詢 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
ABCA1 ELISA KitLRRC39蛋白抗體ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白A1(ABCA1)ELISA試劑盒
ATP8 ELISA Kit自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體ATP合酶8(ATP8)ELISA試劑盒
ATP6 ELISA KitL3MBTL3蛋白抗體ATP合酶6(ATP6)ELISA試劑盒
ATOH1 ELISA Kit富含亮氨酸重復(fù)蛋白25抗體Atonal同源物1(ATOH1)ELISA試劑盒
ATMIN ELISA Kit白介素31受體a抗體ATM交互子(ATMIN)ELISA試劑盒
ATL3 ELISA KitLRSAM1蛋白抗體Atlastin3蛋白(ATL3)ELISA試劑盒
ATL2 ELISA KitLIM結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Atlastin2蛋白(ATL2)ELISA試劑盒
ATL1 ELISA Kit乳酸菌菌體表面蛋白抗體Atlastin1蛋白(ATL1)ELISA試劑盒
Ash ELISA Kit透明質(zhì)酸受體抗體Ashwin蛋白(Ash)ELISA試劑盒
ARTN ELISA Kit白三烯A4水解酶抗體Artemin蛋白(ARTN)ELISA試劑盒
ARK ELISA Kit肝臟X受體抗體Arkadia蛋白(ARK)ELISA試劑盒
ARCH ELISA Kit溶酶體蛋白跨膜β4抗體Archease蛋白(ARCH)ELISA試劑盒
ARCN1 ELISA Kit富含亮氨酸重復(fù)神經(jīng)元5抗體Archain1蛋白(ARCN1)ELISA試劑盒
APTX ELISA Kit親脂性蛋白B抗體Aprataxin蛋白(APTX)ELISA試劑盒
APEX2 ELISA Kit癌癥亮氨酸拉鏈下調(diào)因子1抗體APEX核酸酶2(APEX2)ELISA試劑盒
APEX1 ELISA Kit賴氨酰氧化酶相關(guān)蛋白2抗體APEX核酸酶1(APEX1)ELISA試劑盒
APLNR ELISA Kit基膜聚糖蛋白抗體Apelin受體(APLNR)ELISA試劑盒
AP36 ELISA Kit李斯特菌溶胞素抗體Apelin36蛋白(AP36)ELISA試劑盒
AP17 ELISA Kit亮氨酸羧基甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體Apelin17蛋白(AP17)ELISA試劑盒
AP13 ELISA Kit原癌基因2抗體Apelin13蛋白(AP13)ELISA試劑盒
AP12 ELISA Kit賴氨酰氧化酶樣蛋白4抗體Apelin12蛋白(AP12)ELISA試劑盒
APLN ELISA Kit乳鐵蛋白抗體Apelin蛋白(APLN)ELISA試劑盒
ANO9 ELISA Kit層粘連蛋白1+2抗體Anoctamin9蛋白(ANO9)ELISA試劑盒
ANO8 ELISA Kit富含亮氨酸重復(fù)蛋白15抗體Anoctamin8蛋白(ANO8)ELISA試劑盒
ANO7 ELISA Kit受體蛋白酪氨酸磷酸酶F抗體Anoctamin7蛋白(ANO7)ELISA試劑盒
ANO6 ELISA Kit磷酸化5-脂氧合酶抗體Anoctamin6蛋白(ANO6)ELISA試劑盒
ANO5 ELISA Kit低分子質(zhì)量蛋白2抗體Anoctamin5蛋白(ANO5)ELISA試劑盒
ANO4 ELISA Kit單絲氨酸蛋白激酶1抗體Anoctamin4蛋白(ANO4)ELISA試劑盒
ANO3 ELISA Kit低分子量蛋白酶體7抗體Anoctamin3蛋白(ANO3)ELISA試劑盒
ANO2 ELISA Kit促黃體生成素抗體Anoctamin2蛋白(ANO2)ELISA試劑盒
ANO1 ELISA Kit層粘蛋白α1抗體Anoctamin1蛋白(ANO1)ELISA試劑盒
ANO10 ELISA KitLETM1蛋白抗體Anoctamin10蛋白(ANO10)ELISA試劑盒
ZFAND6 ELISA Kit乳酸脫氫酶抗體AN1-型鋅指域蛋白6(ZFAND6)ELISA試劑盒
PRKAβ1 ELISA Kit磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體AMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)ELISA試劑盒
PRKAα1 ELISA Kit層粘連蛋白β1抗體AMP激活蛋白激酶α1(PRKAα1)ELISA試劑盒
GRIA4 ELISA Kit鼻咽癌癌基因抗體AMPA離子能谷氨酸受體4(GRIA4)ELISA試劑盒
GRIA3 ELISA Kit白血病抑制因子受體抗體AMPA離子能谷氨酸受體3(GRIA3)ELISA試劑盒
GRIA2 ELISA Kit核纖層蛋白A抗體AMPA離子能谷氨酸受體2(GRIA2)ELISA試劑盒
GRIA1 ELISA Kit核纖層蛋白B抗體AMPA離子能谷氨酸受體1(GRIA1)ELISA試劑盒
AKIRIN2 ELISA Kit核纖層蛋白A/C抗體Akirin2蛋白(AKIRIN2)ELISA試劑盒
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。